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氧自由基在肝缺血再灌注损伤中的作用及川芎嗪的影响 |
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织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)活性、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量的变化及观察肝细胞形态学的变化，了解川芎嗪(ligustrazin, LGT)对上述指标的影响，探讨川芎嗪抗HIRI的机理，为加强围手术期肝脏的保护提供理论依据。
材料和方法
一、对象选择和分组：
(一)健康家兔(日本大耳白兔)20只，雌雄兼有，体重2.0～2.5 kg，制备HIRI模型［4］。随机分为两组：对照组(I-R+NS组)，10只，生理盐水1.5 mL/kg,BW分别在肝缺血前20 min和再灌注即刻静脉注入；川芎嗪组(I-R+LGT组)，10只，将生理盐水改为盐酸川芎嗪注射液30 mg/kg,BW(广东省湛江制药厂，批号880201,每支40 mg*2 mL-1)，余同对照组。
(二)18例肝癌患者，男13例，女5例，年龄31～65岁，平均45岁，体重40～61 kg，平均51 kg，均行择期肝叶切除术。随机分成两组：对照组(I-R+NS组)，9例，生理盐水0.15 mL/kg,BW分别在肝门阻断前20 min及再开放即刻恒速静脉滴入(2 min内)；川芎嗪组(I-R+LGT组)，9例，将生理盐水改为盐酸川芎嗪注射液3 mg/kg，BW,余同对照组。两组患者性别、年龄、体重及肝门阻断时间均无显著差异，具有可比性。
二、样品采集：
(一)两组家兔分别在肝缺血前，缺血45 min及再灌注45 min自颈外静脉取血，以测定血浆SOD、GSH-PX、XO及MDA水平，并在再灌注45 min迅速处死，取肝左中叶组织约100 mg，制成匀浆测定SOD、GSH-PX、XO活性及MDA含量。同时取少许肝左中叶组织行光镜、电镜观察。
(二)两组肝手术患者分别在肝门阻断前(缺血前)、阻断25 min(缺血25 min)及再开放25 min(再灌注25 min)自颈内静脉取血，以测定血浆SOD、GSH-PX、XO、ALT及MDA水平。
三、检测方法：
采用黄嘌呤氧化酶法测定血浆SOD活性，化学比色法测定GSH-PX及XO的活性，硫代巴比妥酸法测定MDA含量，赖氏法测定ALT值，前4种试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。HE染色光镜观察，LKB-V型超薄切片机切片，H-500型透射电镜观察。
四、统计处理：
数据均以±s表示，采用组间、组内t检验判断差异显著性。
结 果
一、两组家兔HIRI时血浆和肝组织SOD、GSH-PX、XO活性及MDA含量的变化，见表1。
表1 两组家兔HIRI时血浆和肝组织蛋白的SOD、GSH-PX、XO活性及MDA含量的变化
Tab 1 Changs of SOD， GSH-PX， XO activities and MDA content in plasma and
hepatic tissue protein during HIRI between I-R+NS and I-R+LGT(±s,n=10)
Group SOD(×16.67
×10-6mol·s-1) GSH-PX(×16.67
×10-6mol·s-1) XO(×16.67
×10-9mol·s-1) MDA
(μmol/L)
Plasma
Control Pre-Is 350±27 l80.0±16.7 2.10±1.05 5.70±0.50
(I-R+NS)
Is 45 min 251±31* 72．0±14.3* 3.50±1.74** 6.00±0.55*
Rp 45 min 171±22**△△ 62．0±19.8* 4.60±1.84**△△ 7.70±0.66上一页 [1] [2] [3] 下一页
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