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纤维蛋白 原 在大鼠胸主动脉球囊成形术后肌内膜增殖中的作用 |
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nal surface of injured aorta was observed,and then fibrinogen／fibrin gradually infiltrated into neointima.The incorporation rate of 3H－TdR(the 7th day,(289±147 vs 588±180)counts*min-1/mg，respectively,P＜0.01；the 14th day (242±75 vs 464±91)counts*min-1/mg, respectively, P＜0.01, and myointimal hyperplasia(intima/media area,0.12±0.05 vs 0.36±0.10，P＜0.01；intima/media thickness,0.56±0.28 vs 1.07±0.22，respectively,P＜0.01)of injured vascular tissues were inhibited effectively by the defibrinated agent given at earlier stage after operation.CONCLUSION：Fibrinogen／fibrin may play a role in myointimal hyperplasia of injured vascular wall after balloon angioplasty.
MeSH Endothelium,vascular;Fibrinogen;Muscle,smooth
纤维蛋白原(fibrinogen，Fg)作为血液中的一种重要凝血因子，是冠状动脉粥样硬化发生的一个重要的独立的危险因素［1］。有报道经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)后血管再狭窄(restenosis,RS)的发生与血浆Fg的含量增多有重要关系，但其机理尚不清楚［2］。为此，本文在大鼠胸主动脉球囊损伤模型上观察术后不同时期血浆和组织Fg含量的改变以及降低Fg对术后肌内膜增生的影响，以探讨Fg在血管损伤后肌内膜增殖中的作用。
材料与方法
选用350～400 g健康雄性Wistar大鼠行大鼠胸主动脉球囊成形术［4］。用质量分数为0.5%戊巴比妥钠(50 mg/kg,ip)麻醉动物后，将改良的2F Forgarty 球囊导管经左颈总动脉插入至腹主动脉，然后注入0.1 mL生理盐水使球囊充盈，反复抽拉3次后将血管结扎。术后大鼠分笼饲养，喂食普通饲料，自由饮水，经Evan’s蓝染色、光镜和扫描电镜证实胸主动脉内皮细胞全部剥脱。
1.血浆Fg的生化测定：将大鼠随机分为正常组、假手术组和剥脱组(依术后处死时间不同又分为术后10 min、1、3、7、14和21 d组，每组均6只大鼠)。待大鼠麻醉后，经腹主动脉穿刺取血，3.8%枸缘酸钠抗凝并分离血浆。采用盐析法测定血浆Fg含量［5］。
2.血管壁Fg的免疫组织化学分析：将上述各组大鼠在处死前，采用质量分数为10%中性甲醛缓冲液原位灌注固定取材，经固定、脱水、透明和石蜡包埋后，沿血管纵行切片，切片厚5 μm，裱于用APES处理过的载玻片上。使用美国ZYMED公司生产的SPTM试剂盒进行Fg的免疫组织化学染色。抗纤维蛋白原抗体购自Dako公司(稀释度1∶50)，阳性对照用PBS代替一抗。
3.降低血浆Fg含量后的疗效观察：降低血浆Fg含量采用日本东菱药品工业株式会社生产的东菱克栓酶。将大鼠随机分为剥脱对照组和克栓酶治疗组，每组11只。治疗组大鼠术后即刻股静脉推注东菱克栓酶(10 BU/kg)，术后48 h、96 h再按8 BU／kg腹腔注射各1次。剥脱对照组以等量生理盐水做对照。21 d后在上述动物左心室插管，腹主动脉放血做原位灌注固定，石蜡包埋后切片做HE染色。用计算机图像处理系统(西德产PCA×2）测定新生内膜和中膜的面积和厚度比值。
4.血管条3H－TdR掺入测定［6］：将上述动物分为单纯剥脱对照组和克栓酶治疗组(用药方法用上)，每组又依术后处死时间不同分为术后7 d和14 d组，各组均6只大鼠。放血处死大鼠后，迅速摘取胸主动脉约1.5 cm，在4℃生理盐水中纵行切开后置入1.5mL RPMI 1640 培养液中，再加上一页 [1] [2] [3] 下一页
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