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泉州地区肝炎患者TTV感染状况调查 |
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月～1999年3月我科住院的非A-G型肝炎22例；1998年3～4月住院各类型肝炎35例，同期健康献血员20例，共77人85份血清标本。肝炎诊断符合1995年(北京)第5次全国传染病寄生虫病会议修订的病毒性肝炎诊断标准。
1.2 A-G型肝炎病毒血清标志物的检测 采用抗HAV IgM(上海荣盛)，HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc IgG、抗HBc IgM(上海荣盛/Abbott公司)，抗HCV(华美公司/Abbott公司)，HDAg、抗HD IgM(瑞安公司)，抗HEV IgM(厦门新创公司)的ELISA试剂盒；采用HBVDNA、HCVRNA、HGVRNA(华美公司)的PCR试剂盒，所有操作均按说明书进行。
1.3 TTVDNA的提取及巢式PCR检测 采用厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室与厦门泰伦生物工程有限公司联合研制的TTVDNA巢式PCR检测试剂盒，按产品说明书操作。引物的序列设计，外侧引物对TTVF1：5′-TGCTACGTCACTAACCAC-3′(nt5-22)，TTVR1:5′-CTCCTCTGCGGCGTCTCCTTA-3′(nt733-713)，预计扩增片段长度为729 bp；内侧引物对TTVF2:5′-GTGCACTTCCGAATGGC-3′(nt95-111)，TTVR2:5′-GTAATGCCTGCCAATAAAC-3′(nt283-265)，预计扩增片段长度为199 bp。
2 结果
2.1 TTVDNA的检出率 各类型肝炎患者TTVDNA的检出率为15.8%(9/57)，健康献血员为35.0%(7/20)，见表1。
表1 不同临床类型肝病TTVDNA检出情况
肝病类型 检测例数 TTVDNA阳性数 阳性率(%)
急性肝炎 21 1 4.8
慢性肝炎 23 6 26.1
重型肝炎 5 2 40.0
肝炎肝硬化 5 0 0
酒精性/药
物性肝炎 3 0 0
健康献血员 20 7 35.0
2.2 TTVDNA在各类型病毒性肝炎中的检出情况 乙型肝炎(或重叠丁型肝炎)患者TTVDNA阳性率为25.0%(6/24)，非甲～庚型病毒性肝炎TTVDNA阳性率为13.6%(3/22)，而甲和/或戊型肝炎患者7例均未检出。见表2。
表2 TTV与各类型肝炎病毒感染状况分布
病原类型 检测例数 TTVDNA阳性数 阳性率(%)
non A-G 22 3 13.6
HAV/HEV 7 0 0
HBV 18 5 27.8
HBV+HDV 6 1 16.7
HGV 1 0 0
Total 54 9 16.7
2.3 TTV感染的肝炎患者的临床特点 TTV感染的肝炎患者9例中男7例、女2例，年龄33.2±13.4岁(25～59岁)。有受血史者3例，而且均为采血前1月受血，其中1例非甲～庚型重型肝炎患者输血前TTVDNA阴性，输血后16天TTVDNA转为阳性，2个月后TTVDNA又转为阴性，该例输血感染TTV后，未出现病情加重表现，而且临床恢复顺利。9例血清白蛋白37.40±6.66 g/L，胆红素203.58±270.23 μmol/L，ALT 406.0±314.22 u/L，AST 212.44±128.16 u/L，GGT 91.0±58.22 u/L，PT 17.67±6.35sec.。9例治愈及好转8例，死亡1例(慢重肝、乙丁型重叠感染，死因为肝昏迷、急性溶血性贫血)。
3 讨论
TTV是新近才被发现的一种与输血后肝炎有关的新型单股DNA病毒，该病毒基因序列长约3.7 kb，含有ORF1与ORF2两个开放读码框，分别编码774与172个氨基酸［4］。我们根据这段序列，设计了两对特异性引物，建立了检测血清TTVDNA的巢式PCR方法，从本组1例非甲～庚型慢性肝炎患者血清中扩增出了一条199 bp的特异片段，经测序与TTV的同源性为87%，从而证实了TTV在我国非甲～庚型肝炎患者血清中的存在［3］。在此基础上，对泉州地区肝炎患者血清TTVDNA检测表明，TTV有较高的感染率,达15.8上一页 [1] [2] [3] 下一页
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