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大鼠腓浅神经传入纤维在脊髓胶状质的定位投射 FRAP法 |
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丁继固 任立恩 陈小武 蔡丽霞 胡松林
(咸宁医学院解剖学教研室，咸宁 437100)
摘 要 为了解大鼠腓浅神经传入纤维在脊髓胶状质(SG)的投射定位，按照跨神经节溃变原理，用抗氟化物酸性磷酸酶(FRAP)法和显微测量进行定量研究。结果显示：大鼠腓浅神经向SG的纵向投射主要为L2～6，L2～6各节段SG水平切面“眉毛状反应带”弧形长均值分别为0.795、0.849、0.913、0.921、0.852mm；而腓浅神经向L2～6各节段SG水平切面投射均值分别为0.447～0.533、0.384～0.561、0.351～0.598、0.338～0.611、0.383～0.561mm的范围。结果表明，腓浅神经反应带占据SG中间区域。
关键词 腓浅神经 跨神经节溃变 胶状质 抗氟化物酸性磷酸酶法 大鼠
有关周围神经传入纤维向SG投射的研究，国内外不少学者曾有报道，如Knyihar和Csillik［1］曾切断大鼠左侧坐骨神经，4d内导致L4～S1节段SG内FRAP反应完全消失(水平方向的定位未作描述)。邱树华［2］用血管钳挫伤左侧坐骨神经，结果于L3～S1节段左侧SG中间内侧2/3部位的FRAP活性消失。朱培纯［3］、胡松林［4］等均做过这方面的研究，但对其局部定位均未作测量，本研究试图在上述研究基础上对腓浅神经传入纤维在SG的定位进行显微测量研究，为针刺镇痛及内脏牵涉痛原理提供较为准确的形态学依据。
材料和方法
用健康Wistar大鼠20只，雌雄不拘，体重180～250g，水合氯醛腹腔注射麻醉(300mg/kg)，然后在腓骨颈处切断腓浅神经(切断左侧5只，切断右侧5只，双侧切断10只)。非手术侧作为本实验的对照侧。依据跨神经节溃变时间［5］，术后存活7～12d，活体断头迅速暴露腰骶部脊髓，按神经根确定各节段并做标记。取出L1～S1脊髓，放在-15℃冰台上数分钟，按标记再分段，将各段分别置于-15℃恒冷切片机上做20～25μm的连续横切，每个节段又按上、中、下3部分贴片，将切片迅速吹干，固定于甲醛钙液内10min，按FRAP法［6］，以β-苷油磷酸为底物(pH 4.7)，硝酸铅为捕获剂加入0.02mmol/L氟化钠，以抑制胶状质以外其他部位溶酶体内的酸性磷酸酶(AcP)，在37℃恒温下孵育4～6h，经硫化铵处理，以显示胶状质内溶酶体外的FRAP。
经上述处理后，再将显色的切片置于(10×10)光镜下，用物镜测微尺(0.01mm)标定好目镜测微尺(每1刻度为0.0134mm)，设胶状质的内侧端为“0”值，对各显色切片中双侧SG内FRAP活性的水平向“眉毛状反应带”长及其消失区进行观察测量，将所测值进行统计学处理，以确立腓浅神经传入纤维在SG的投射模式。
结果
非手术对照侧与手术侧L1下段、S1上段FRAP活性均呈黑色“眉毛状反应带”，未见消失区(图1)；切断腓浅神经实验侧，L2～6节段SG中间带呈现宽窄不等的FRAP活性消失区(图2～6)。L2～6各节段SG“眉毛状反应带”长及消失区测值亦不同，反应带L2为0.795mm，消失区在0.447～0.533mm范围(但上部5例、中部9例、下部17例)；L3为0.849mm，消失区在0.304～0.561mm范围；L4为0.913mm，消失区在0.351～0.598mm范围；L5为0.921mm，消失区在0.338～0.611mm范围；L6为0.852mm，消失区在0.383～0.561mm范围(但中部仅15例、下部9例)，各节段上、中、下3部分测值见附表。
附表 大鼠腓浅神经切断侧脊髓胶状质FRAP活性消失区测微匀值(mm) N:20
Table The micromeasurement s mean value of the FRAP activity disappearea area in SG of the
spinal cord on the rat s superficial peroneal nerve cut side
L2 ΣX L3 ΣX L4 ΣX
上
upper 中
medial 下
lower 上
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