|
V79和V798细胞周期及其调控因子的差异比较 |
| |
in D3 3.CDK4 4.Id a.V79 b.V79-8
Fig.2 Northern blotting analysis of cyclinD1,cyclinD3,CDK4,Id genes expression in V79 and V79-8 cells
Riboprobes:1.cyclin D1; 2.cyclinD3; 3.CDK4; 4.Id
a.V79； b.V79-8
讨论
由于［3H］胸腺嘧啶核苷参入法和流式细胞光度术方法上的差异，使得两者在细胞周期分析时可以得到不同的结果。前者以是否标记上［H3］胸腺嘧啶核苷来划分是否属于S期，而后者是以DNA的含量来给细胞分期的，如果细胞只有极少量的DNA合成，那么用前一方法应归为S期，用后一方法则归为G1期。但用流式光度术测得V79-8细胞有G1期，而同时也测量V79细胞的G1期，这样就可以比较两者G1期的差异，结果是V79G1期的细胞多于V79-8，结合以往［3H］胸腺嘧啶核苷参入的结果［1，2］，说明M期结束后V79-8较V79更快进入S期开始DNA的合成。另外，PCC(premature chromasome condensation)的结果也表明V79-8细胞存在G1期［6，7］。这两种细胞G1期的差异为研究G1期的调控提供了很好的模型。同时，V79-8细胞周期的特殊性也使其成为细胞周期调控研究的极好模型，我们用反义的G1期调控因子CDK4、cyclin D3以及正义的p21Cip1转染V79-8细胞，都使其出现了明显的G1期，而用反义的cyclin B1转染V79-8细胞则出现了明显的G2期(将陆续发表)。
cyclin D1、D3为G1期cyclin，它们可以与CDK2、4、5结合，形成激酶复合物［8］，促进G1/S的转换。两者高水平的表达，使上述激酶活性提高，磷酸化下游底物，例如Rb蛋白磷酸化后可释放结合的转录因子E2F-1，促进DNA复制起始物的合成，加快向S期的转换。Id基因为分化抑制基因，具有抑制分化、促进增殖的作用，也是G1期的调控因子。在肌肉细胞中，Id基因的表达可以拮抗肌源性b-HLH调节因子(如MyoD)的作用，以达到抑制肌肉细胞分化的作用，说明Id基因在成纤维细胞的分化与增殖中起一定的作用，V79-8细胞中Id的高表达促进细胞G1/S的转换，加快细胞周期的运转［9］。另外，我们以往的研究发现反义Id基因可以抑制肿瘤细胞的生长，这从反面证实了Id的生长促进作用［10］。
Rao等［6］发现V79-8细胞中，DNA合成诱导物质水平在整个周期中保持不变，M期也保持较高水平，这样在进入下一轮周期时为起始DNA合成的准备期G1期就大大地缩短，甚至检测不出。从以上结果可以推测这些诱导物质就是推动G1/S转换的调控因子，其中就包括cyclin D1、cyclin D3和Id。
收稿1997-03 修回1997-05
参考文献
［1］Liskay B M.Absence of a measurable G2 phase in two Chinese hamster cell lines.Proc Natl Aca Sci USA,1977,74(4):1622
［2］Liskay B M.Most of the G1 period in hamster cells is eliminated by lengthening the S period.Proc Natl Aca Sci USA,1981,78(10):6295
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 腺病毒载体介导的人类B7 1基因修饰的肿瘤细胞疫苗
下一个医学论文： 在发育过程中小鼠脑N
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文