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(0.5mg/kg,共2次),预处理后再进行实验。盐水组同菌液组操作一样,在同样时间内注射等体积的生理盐水。注菌或注生理盐水后10min内从舌下静脉注入2%的伊文思兰(0.2mL/100g体重)。 3.脑组织水份含量及伊文思兰含量测定:各组动物观察至规定时间后断头处死,迅速取脑,去除皮质表面的软脑膜及凝血块,取左侧大脑半球后1/3全层脑组织标本(约0.1~0.2g,包括灰质和白质),采用干湿法测定脑组织含水量。取大鼠左大脑半球前1/3全层脑组织,称重后置入存有3 mL甲酰胺的试管中,37℃水浴48h后用722光栅分光光度计进行比色,波长为632nm,蒸馏水作空白比色,测定其光密度值,根据标准曲线,计算出EB的含量。 4.脑组织电镜检查:盐水组或菌液组SD大鼠观察至规定时间后,采用多聚甲醛-戊二醛固定液从左颈总动脉活体灌注固定30min,断头开颅取脑置于上述固定液中,4℃冰箱保存过夜,常规脱水包埋制片,经H6000型电镜观察。 5.数据处理:本文测定值用均数±标准差(±s)来表示,相同时间亚组的多个均数比较采用方差分析,显著性检验水准α=0.05;脑水份含量和EB之间的关系采用直线回归相关分析。全部资料用SPSS软件在计算机上分析。
结 果 各个时间组感染性脑水肿脑组织含水量与EB含量的均数、标准差、方差分析及其相关分析结果见下表。各个时间菌液组(PB)脑组织含水量明显高于盐水对照组相应侧脑组织含水量(P<0.05);菌液组EB含量明显高于盐水对照组相应侧EB含量(P<0.05),尤以4h菌液组最明显,差异有高度的显著性(P<0.01)。应用nimodipine治疗后注菌侧脑组织含水量和EB含量明显低于百日咳菌液组脑组织含水量和EB含量(P<0.05),以4h治疗组疗效最佳。MK-801预处理组脑组织含水量与EB含量在30min时间组无明显改变,在4和24h组则明显降低(P<0.05)。菌液组各时间亚组脑组织含水量与EB的含量呈高度正相关(r>0.90,P<0.05)。
表1 不同时间大鼠感染性脑水肿EB和脑含水量(BWC)及其相关系数
Tab 1 The changes of EB and BWC in the brain edema induced by injection of PB,and relationship between EB and BWC
n BWC(%) EB(μg/g ww) r(P) 30 min NS 5 78.60±0.40 1.30±0.30 0.87(P<0.05) PB 5 80.35±0.51△ 2.62±0.63△ 0.98(P<0.01) Nim 5 79.04±0.35* 1.73±0.16* 0.95(P<0.01) MK-801 5 79.97±0.65△ 2.04±0.46△ 0.97(P<0.01) 4 h NS 8 78.91±0.21 1.63±0.32 0.98(P<0.01) PB 10 82.09±1.74△△ 4.65±1.55△△ 0.97(P<0.01) Nim 8 78.93±0.68* 1.72±0.61** 0.96(P<0.01) MK-801 6 79.02±0.45* 2.30±0.38* 0.75(P<0.05) 24 h NS 6 78.61±0.20 1.46±0.36 0.99(P<0.01) PB 10 81.06±1.06△ 2.70±0.78△ 0.91(P<0.01) Nim 7 78.76±0.51* 1.74±0.52* 0.66(P>0.05)
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