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异双聚体电泳及其在遗传学差异筛选中的应用 |
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碱基愈多，泳动速度愈慢，相差距离愈大。实验证明，对于200～800 bp的任何PCR扩增产物，均不需任何特殊的设备，仅靠常规的PAGE电泳即可检出与参考DNA序列的差异程度。
Buonaguro等〔3〕成功地将异双聚体DNA电泳方法用于人HIV-I型病毒V3区DNA序列的遗传学分析及亚型鉴定，取得了满意的效果。本文用此法作为人口腔病原菌基因测序的前奏，亦取得了比较一致的结果。
图1 异双聚体聚丙烯酰胺凝胶电泳图
M.DNA碱基对数标准(λ噬菌体DNA经ECoRI 及Hid Ⅲ酶切片断);1.参考DNA（Pg W50 rDNA间隙区PCR扩增产物）;2～14.参考DNA＋受检DNA（牙周炎患者龈沟液中Pg阳性菌株rDNA间隙区 PCR扩增产物）。
作者单位：广东省汕头大学医学院生物化学教研室,汕头515031
参考文献
1 Ganguly A, Rock M J, Prockop D J. Conformation-sensitive gel electorphoresis for rapid detection of single-base differences in double-stranded PCR products and DNA heteroduplexes. Proc. Natl. Acad Sci. USA, 1993, 90: 10325～10329
2 Delwart E L, Shpaer E G, Louwagie F Eet al.Genetic relationships determined by a DNA heteroduplex mobility assay: analysis of HIV-1 env genes. Science, 1993, 262: 1257～1261
3 Bunaguro L, Gaudio E D, Monaco Met al.Heteroduplex mobility assay and phylogenetic analisis of V3 region sequences of human immunodeficiency virus type 1 isolates from Gulu, Northern Uganda. J. virol., 1995, 69: 7971～7981
4 Leys E J, Gliffen A L, Strong S Jet al.Detection and strain identification of Actionobacillus actinomycetemcomitans by nested PCR. J. Clin. Microbiol., 1994, 32: 1288～1294
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