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抗肿瘤药对膀胱癌细胞产生的免疫抑制因子作用的影响 |
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， RPMI 1 640完全培养液重悬细胞， 调细胞至上述密度， 置37℃、 5% CO2中培养24 h， 收获上清测定TDSF活性， 方法按文献［2，3］。
2 结果
IL-2的分泌及反应性受到膀胱癌细胞培养上清液强烈的抑制作用(表1)；膀胱癌细胞培养上清液的临床确诊未经治疗膀胱癌患者血清对淋巴细胞激活增殖无一例外地 表现出强烈的抑制作用(表2)。 膀胱癌细胞培养上清液和膀胱癌病人血清无细胞毒作用， T DS F对IL-2的分泌及反应性， 对淋巴细胞激活增殖有剂量依赖关系， 本文结果与文献［ 3］报道一致。
表1 膀胱癌细胞培养上清液对IL-2分泌反应性的抑制作用
细胞株 n IL-2分泌 IL-2反应性
*△CPM
(±S) 抑制率
(%) *△CPM
(±S) 抑制率
(%)
对照 9 54 569±4 060 - 49 161±2 048 -
2BS 9 48 590±6 643 10.9 45 874±1 253 6.7
BIU-87 9 3 171±354 94.0* 12 668±1 698 74.2*
*与对照比较，P＜0.01
CPM=测定管CPM-空白管CPM-本底CPM值示PHA对淋巴细胞或IL-2对效应细胞激活增 殖的CPM值
表2 膀胱癌细胞培养上清液和膀胱癌病人血清对
PHA激活淋巴 细胞的抑制作用
级别 n *△CPM
([ AKx-D〗±S) 抑制率
(%)
对照 9 22 740±2 204 -
2BS 9 22 161±961 2.8
BIU-87 9 2 433±527 89.3*
膀胱癌 9 12 352±1 209 45.9*
*与对照比较，P＜0.01
用PHA-P刺激T淋巴细胞转化增殖时， 其它条件固定不变， 分别加入不同稀释度( 10-1～10-6)BIU-87细胞培养上清液， 用3H-TdR掺入法测定淋巴细胞 DNA合成情况。 结果表明， 随着瘤细胞上清液浓度增高， 抑制作用增强， 而2BS人胚肺细 胞培养上清液在各种稀释度上未见有明显的抑制作用(图1)。 抗癌药Mit 和5-FU对瘤细胞分泌TDSF都有阻抑作用(图2)。
用PBMC1 ×106/mL， 加入PHA-P10 μg/mL及10%瘤细胞培养上清液 (或10%膀胱癌患者血清)培养72 h， 台盼蓝染色 计数死细胞， 所有实验中PBMC存活率均达 98% 以上， 与对照组无明显差异， 可见各种瘤细胞上清液和膀胱癌患者血清无明显细胞毒作用 。
3 讨论
T细胞承担着抗微生物， 移植物排斥和肿瘤的免疫监视等一系列重要生理功能， 是 细 胞免疫的主要执行者， 在体内通过分泌IL-2而发挥一系列重要的免疫效应［4］。 因此IL-2的作用日益受到重视希望大量产出， 但是迄今为止IL-2和IL-2诱导LAK细 胞对肿瘤进行过继性免疫治疗和效果远不能令人满意。 究其原因之一， 可能与TDSF抑制淋 巴细胞增殖， IL-2的产生和反应性及其对LAK细胞诱导受TDSF的抑制有关。 所以， 研究T DSF与IL -2的关系有十分重要的意义［5］。 将PBMC与瘤细胞共育6 h， 即可观察到明显的 抑制作用， 说明TDSF主要影响T细胞活化早期。 如何阻抑TDSF的抑制作用， 本文用抗肿瘤 药 与癌细胞进行共育实验， 结果两种抗肿瘤药能部分阻断TDSF的免疫抑制作用。 说明干扰核 代谢或直接破坏DNA结构的抗肿瘤药物， 亦具有消肿病免疫逃逸的作用，其有关机制 仍在研究中。
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