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冬虫夏草醇提取物对大鼠缺血再灌注过程心肌保护作用研究 |
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效液相色谱仪，色谱柱：Hypersi/BDS填料，4.6×150 mm，紫外检测波长210 nm，灵敏度0.46 UFS，流动相组成：215 mmol/L KH2PO4\,2.3 mmol/L硫酸氢四丁胺和3.5%乙腈水溶液，pH 6.25。
三、实验动物及实验步骤：
健康雄性Wistar大鼠(本校肿瘤研究所实验动物室提供)，体重(250±40)g，随机分为4组：对照组(灌流55 min)，缺血再灌(ischemia／reperfusion,I／R）组(预灌15 min、缺血20 min\,再灌20 min)，刺五加+I/R组、虫草+I/R组(同上)，按0.2 mL药液/L KHB液的药量给药100 mL。采用Langendorff离体心脏灌流法造成心脏缺血再灌注模型。灌注结束，立即在-70℃下将心肌冷冻，(1)作高能磷酸化合物含量测定：将左室心肌称重，在0.42 mol/L高氯酸溶液中0～4℃制成匀浆(100 mg/mL)，按100 mg组织加0.35 mL氢氧化钾的量中和后，用超声细胞粉碎器打碎(250 mA超声3 min)使能量物质释放。7 000 r/min离心10 min，上清液用0.25 μm微孔滤膜过滤去杂质，取10 μL注高效液相色谱检测。(2)MDA水平测定，按文献［3］所述方法测定。
四、统计学处理：
实验数据采用平均数±标准差(±s)表示，组间差异显著性采用t检验方法判别。
结果
1.大鼠心肌组织中ATP及总腺苷酸(TAN)含量变化：I/R组含量显著低于对照组(P＜0.01)，刺五加(AS)+I/R组显著高于缺血组(P＜0.01)，但仍不及对照组水平(P＜0.01)。虫草组(CP)+I/R显著高于缺血I/R组及刺五加+I/R组(P＜0.01)，与对照组无显著差异，见表1。
2.冬虫夏草醇提取物对大鼠心肌组织中脂质过氧化物(MDA)水平的影响：I/R组MDA水平明显高于对照组(P＜0.01)，刺五加+I/R组、虫草+I/R组明显低于I/R组(P＜0.01)，虫草+I/R组更优于刺五加+I/R组，见表2。
表1 心肌样品中高能磷酸化合物的含量
Tab 1 The content of high energy phosphate compound in myocardium (±s)
Group n ATP ADP AMP TAN
Control 6 2.12±0.08 3.77±0.49 1.31±0.29 7.15±0.84
I/R 6 0.74±0.07** 1.81±0.23 0.93±0.36* 3.48±0.42**
AS+I/R 6 1.38±0.15*△ 2.59±0.58*△ 1.15±0.11 5.23±0.59
**△△
CP+I/R 6 2.00±0.13＃＃ 3.16±1.04＃＃ 1.80±0.54＃ 7.48±0.53＃＃
*P＜0.05，**P＜0.01，vs control;△P＜0.05，△△P＜0.01，vs I／R；＃P＜0.05，＃＃P＜0.01，vs I／R， or AS＋I／R；TAN=ATP+ADP+AMP；AS＝Acanthcpanox;CP=cordyceps
表2 虫草醇提取物对大鼠心肌MDA的影响
Tab 2 The effect of cordyceps on MDA leval in rat myocardium (±s)
Group n MDA(nmol/g)
Control 10 43.07±11.32
I/R 8 58.89±9.24**
AS+I/R 9 43.54±9.54＃＃
CP+IR 6 36.06±7.17＃＃
**P＜0.01, vs control; ＃＃P＜0.01 vs I/R
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