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茶多酚在体外诱导HL |
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赵燕 曹进 刘箭卫 祝和成 马洪
摘 要 目的：寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂。方法：选用茶的主要活性成分茶多酚，采用噻唑蓝(MTT)还原法，DNA凝胶电泳以及透射电镜技术，在体外观察了茶多酚对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)凋亡的影响。结果：被250 mg/L茶多酚作用5 h后HL-60细胞进行凝胶电泳呈现出典型的DNA条带，透射电镜下看到凋亡小体，茶多酚对HL-60细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞杀伤作用。结论：在体外培养条件下，茶多酚可诱导HL-60细胞凋亡。
主题词 茶；酚类；白血病
Induction of apoptosis by tea polyphenols in HL-60 cells
ZHAO Yan, CAO Jin, ZHU He-Cheng, MA Hong, LIU Jian-Wei
Tea and Health Lab. Hunan Medical University, Changsha (410078)
Abstract AIM To study anticarcinogenic mechanism of polyphenolic compounds in tea.METHODS： The apoptosis inducing effects of tea polyphenols (TP), the main active component purified from tea, were observed on the human promyelocytic leukemic cell (HL-60) by thiazolyl blue tetrazolium bromide reduction test, DNA agarose gel electrophoresis and transmission electronic microscopy technique.RESULTS：After treating HL-60 cells with TP in 250mg.L-1 for 5h, DNA extracted from HL-60 cells showed a typical internucleosomal DNA degradation, i.e., DNA ladder and apoptosis vehicles were observed. The effect of TP was showed to parallel with its cytotoxic activity in HL-60 cells.CONCLUSION：The mechanism of antitumor action of TP is related to its apoptosis inducing activity.
MeSH Tea; Phenols； Leukemia
茶多酚(tea polyphenols)是以茶中酚类及其衍生物为主的酚性化合物。一些研究表明［1，2］，茶多酚对癌症具有良好的化学预防作用，其机理是茶多酚类化合物具有明显的拮抗促癌物12－氧－十四烷佛波醇－13－乙酸酯(12－0－tetra－decanoylphorbol－13－acetate,TPA)的多种生物学作用，以及抑制与致癌物代谢活化相关的细胞色素P450酶系。为进一步探讨茶多酚抑制癌变的机制，本实验观察了茶多酚对体外培养的HL-60细胞凋亡的影响。
材料与方法
一、材料：
(一)细胞系及培养条件：人急性早幼粒白血病细胞株(human acute promyelocytic leukemia cell line: HL-60),由本校血液生理研究室提供。接种于含15%小牛血清(华美生物工程公司，经56℃，30 min灭活)，100 U.mL-1青霉素及100μg.mL－1链霉素的RPMI-1640培养液，在37℃含体积分数为5%CO2的培养箱内培养传代；4℃ 1000r/min离心5～10 min收集。
(二)药品与试剂：茶多酚由本校茶与健康研究室提供(含量86.0%)，生理盐水溶解，0.45 μm微孔滤膜灭菌备用。喜树碱(camptothecin, CAM)(广西东兰制药厂)用二甲基亚砜(DMSO)溶解，RNase A(华美生物技术公司)和Proteinase K(美国，BTL)：均按分子克隆操作指南［3］配[1] [2] [3] 下一页
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