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应用液相放大酶免分析检测特异性IgE的方法学研究 |
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9.5、15.1、7.6、3.9，期望值(U/ml)为14.8，7.4，3.6；实测值/期望值(%)为102、103、108。
3 讨论
变应原的化学修饰是L-BA-EIA检测变应原SIgE的核心技术，其基本过程是：将生物素以多价的结合形式连接在可溶性大分子骨架上(如：Ficoll,dextran)，它可称为液相支持物。而变应原则依次以NH2-、OH-、COOH-、SH- 键与大分子骨架相联，由此确保了SIgE在变应原上的结合位点。实验表明经修饰后的变应原首先与血样中SIgE在液相中的反应，在短时间内即可达到平衡，由此提高了反应的动力学。在免疫分离过程中，固相载体(聚苯乙烯)则包被有BSA-Biotin；并以链亲和素作为桥臂，通过配体与抗配体的高度亲和力完成了分离过程，增加了实验的灵敏度。提高了固相免疫复合物的量，此法全过程只需3.5 h。并且L-BA-EIA的免疫分离模式有利于实现免疫分析的自动化。实验结果表明：该方法灵敏度为0.2 U/ml，其余各项指标均能够满足临床需要。本方法改进了变应原的修饰线路［2］，其优点是中间产物少、产率高。应用本文方法可标记国人常见的过敏物，有利于国产化，另外本文应用链亲和素替代亲和素作为桥臂，进一步降低了背景信号，效果满意。
①本课题受全军九五医药卫生科研基金资助(96D006)
作者简介：陈东松，男，39岁，主管技师，从事变态反应学免疫分析研究
作者单位：陈东松 范淑娟 王 苏 潘洪涛 高红丽 李 岩 曲 颖 蔡颖华(中国人民解放军第208医院，长春130062)
阮承迈 杨振国 (中国人民解放军农牧大学，长春130062)
4 参考文献
1 陈东松，阮承迈，刘卫林 et al.液相放大酶免分析检测血清总IgE的方法学建立.中华医学检验杂志，1999;22(3):160
2 El Shami As, Alaba O. Liquid phase in vitro allergen specific IgE assay with in situ immobilization. Adv Biosciences, 1989;74：191
3 Nolte H, Dubuske L M. Performance characteristics of a new automated enzyme immunoassay for the measurement of allergen-specific IgE. Summary of the probability outcomes of allergen testing to results obtained with the HYTEC system and CAP system. Ann Allergy Asthma Immunol,1997;79:27,65,191,337
4 Haun M, Wasi S. Biotinylated antibodies bound to streptavidin beads: a versatile solid matrix for immunoassays. Anal Biochem,1990;191:337
5 Olivieri V, Beccarini I, Galluccu G et al. Capture assay for specific IgE. An improved quantitative method. J Immunol Methods,1993;157：65
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