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高温致金黄地鼠神经管畸形中细胞凋亡的组织学观察 |
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处理后2h和4h，对照组胚胎神经褶高起，神经上皮游离面有大量微绒毛。实验组在组织结构上与对照组相比无明显差异。
处理后8h和16h，对照组胚胎大部分神经褶在中线愈合，形成神经管。前、后神经孔仍然存在，实验组胚胎发育迟缓，两侧神经褶外翻，神经上皮游离面的微绒毛明显减少，并出现许多泡状突起。
处理后24h和48h，对照组胚胎前、后神经孔已经闭合，胚胎卷折形成了“C”字形筒状胚(图1)。实验组多数胚胎两侧神经褶未闭合，胚胎也未卷折(图2)。神经管腔面常见脱落的凋亡细胞和凋亡小体。
处理后72h和96h，实验组胚胎明显小于对照组胚胎，仍有部分胚胎的前、后神经孔没有闭合。
3.光镜观察
3.1 对照组：各期胚胎神经管上皮细胞排列紧密，边界整齐，近腔面常见细胞分裂像。神经管周围间充质细胞数量较多，分布均匀，很少见到凋亡细胞。
3.2 实验组：高温处理后2h和4h，胚胎在组织结构上与对照组相比无明显差异。高温处理后8h，神经上皮排列紊乱，边界不整，细胞多呈圆形，细胞分裂像少见，细胞凋亡增多，主要表现为核固缩和胞质浓缩(图3)。周围间充质细胞数量减少，分布不均。高温后16h，神经上皮和周围间充质细胞凋亡数明显增加，并有大量凋亡小体出现，尤以头部两侧最为明显。高温处理后24h和48h，细胞分裂像逐渐增加，细胞凋亡数减少。高温72h和96h后，恢复至对照组水平。
4.透射电镜观察
4.1 对照组：神经上皮细胞核大呈椭圆形，核膜清楚，染色质疏松，核仁明显。胞质内多聚核糖体丰富，线粒体和内质网较少。细胞近腔端有明显的紧密连接。
4.2 实验组：高温处理后2h，神经上皮细胞内可见核内空泡，空泡表面核膜模糊。4h后可见核仁松散，部分线粒体呈分叶状或呈巨大线粒体。高温处理后8h，核膜皱缩呈不规则状，染色质凝集在核周部，其表面的核孔消失，凋亡的细胞与周围的细胞分离。靠近管腔面的神经上皮细胞表面的微绒毛消失，并出现了大量的异常胞质突起(图4，5)。高温处理后16h，可见胞质内出现大量空泡，核固缩明显，凋亡小体增多(图7)，邻近细胞内可见被吞噬的凋亡小体。靠近管腔面的神经上皮细胞其胞质突起更加明显，部分脱落进入管腔。高温处理后24h和48h，细胞凋亡逐渐减少，凋亡小体和脱落的胞质突起被邻近的细胞吞噬(图8)，于72h后细胞凋亡恢复至对照组水平。
神经管周围间充质细胞凋亡的超微结构改变与神经上皮类似(图6)。
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