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人外周血树突状细胞在LAK抗HPBALL细胞中作用的研究 |
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结 果
1.DC纯度
经S-100蛋白染色检测，计数的阳性细胞数744，阴性细胞数56，阳性率93%。
2.杀伤试验
2.1 析因试验(表1、图1)
单独DC在5×105L、1×106/L、1×107/L、5×107/L浓度下未检测到对HPBALL的杀伤作用。(P＜0.05)
由图1可见：(1)5×105～1×107/L DC有增强不同E/TLAK杀伤活性的趋势，而1×107～5×107/L DC对LAK杀伤活性有抑制趋势。(2)DC调节LAK活性的较适浓度范围为：1×106～1×107/L。(P＜0.05)
2.2 正交试验(表2、图2)
表1 析因试验的因素及水平
Table 1 The arrangement of factors and levels in factrial test
(HPBALL:1×109/L)
因 素
factors 水 平(level)
1 2 3 4
树突状细胞(细胞数/升)
DC (cells/L) (A)5×107
1×107 1×106 5×105
LAK细胞(效/靶)
LAK (E/T) (B)4/1
2/1 0
白介素-2(单位/升)
rIL-2 (IU/L) (C)1×106
0
表2 正交试验的因素及水平
Table 2 The arrangement of factors and levels inorthogonal test
(HPBALL:1×109/L)
因 素
factor 水 平(level)
1 2 3
树突状细胞(细胞数/升)
DC (cells/L) (A)1×107 5×106 1×106
LAK细胞(效/靶)
LAK (E/T) (B)10/1 5/1 0
白介素-2(单位/升)
rIL-2 (IU/L) (C)2×105 1×105 0
DC培养时间(天)
culturing time of DC(d) (D)0 4 7
据SAS软件数据处理结果，所得趋势图为：
图1 析因试验趋势图
Fig.1 The tendancy of each level in factorial test
根据数据处理结果，所得趋势图为：
图2 正交试验趋势图
Fig.2 The tendancy of each level in orthogonal test
从图2可见DC、LAK杀伤HPBALL的最佳组合条件为：DC培养4d、浓度5×106/L，LAK(E/T)=10/1,rIL-2=0。(P＜0.01)
3.DC、LAK、HPBALL相互作用的形态学观察
3.1 正常DC 形状不规则，表面有大量突起，核形状不规则、染色较淡、核膜周围有致密的异染色质，胞质内有较多的线粒体，可见空泡和脂滴；而高尔基复合体，内质网少见，溶酶体少量或没有(图3)。
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