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u;g/ml庆大霉素的RPMI 1640(GIBCO，美国)培基中。Gifu 10007菌株为本室保存的野生型沙门氏伤寒菌菌株。
1.2 沙门氏伤寒菌培养物的制备 挑取Gifu 10007单个菌落接种于SOB液体培基中，37℃、5%CO2静止过夜培养，再转接到新鲜SOB液体培基中继续培养4 h，达到对数生长期。在感染试验中取出适量培养物，PBS洗1次，悬浮在RPMI 1640中，同时取培养物，经适当稀释后，涂平板，过夜培养后计数菌落数，以确定培养物中的细菌浓度。
1.3 THP-1细胞的制备 离心收获培养4 d的THP-1细胞，用预温的RPMI 1640洗2次，计数细胞数，悬在含有10%FBS和50 μg/ml庆大霉素(或不含)的RPMI 1640培基中，使细胞浓度达2.0×106 ml-1或2.3×106 ml-1。
1.4 PMA 处理THP-1细胞 在细胞悬液中加入适量PMA(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate,Wako,日本)，使终浓度达到160 nmol/L，然后接种细胞悬液到组织培养板中，37℃、5%CO2条件下孵育48 h后，用预温的RPMI 1640培基洗细胞3次。
1.5 IFN-γ活化THP-1细胞和PMA分化的THP-1细胞 在THP-1细胞或PMA分化的THP-1细胞中加入浓度为1 000 U/ml的IFN-γ(人类重组IFN-γ，Genzyme,美国)，37℃、5%CO2条件下孵育24 h，细胞经预温的RPMI 1640培基洗1次后，用于感染试验。
1.6 Gifu 10007菌感染细胞 THP-1细胞、IFN-γ活化的THP-1细胞、PMA分化的THP-1细胞和IFN-γ活化的PMA分化的THP-1细胞的感染，是在洗后的细胞中加入适量的Gifu 10007菌培养物，使细胞与细菌的比例约为1：10，37℃、5%CO2条件下孵育1 h，使细胞被感染。用预温的RPMI 1640培基洗细胞3次后，加入含10%FBS和50 μg/ml庆大霉素的RPMI 1640培基，继续孵育在37℃、5%CO2条件下，此时作为细菌感染细胞后的起始时间。
1.7 内化及胞内存活测定 在细菌感染细胞后的不同时间点，去除培养上清，加入1%Triton X-100溶液，室温保持10 min，以裂解细胞释放胞内菌。稀释细胞裂解物达适当浓度，接种到HI平板上，37℃过夜培养，计数生长的菌落数(以CFU/ml表示)。
1.8 细胞因子的诱导及检测 2.0×106 THP-1细胞、IFN-γ活化的THP-1细胞、PMA分化的THP-1细胞和IFN-γ活化的PMA分化的THP-1细胞，经 Gifu 10007菌感染后24 h，收集培养上清，保存于-80℃。用TNF-α和IL-12检测试剂盒(Biotrak,英国)按其说明进行操作，酶标检测仪(Pynatech MR5000,美国)上分别测定样品的TNF-α和IL-12含量。
2 结果
2.1 IFN-γ调节THP-1细胞内化Gifu 10007菌 实验结果表明，IFN-γ显著增强THP-1细胞和PMA分化的THP-1细胞内化Gifu 10007菌(图1)。
2.2 IFN-γ调节THP-1细胞杀伤胞内Gifu 10007菌 实验发现，Gifu 10007菌在THP-1细胞中增殖，但在IFN-γ活化的THP-1细胞中其增殖明显受到抑制。IFN-γ显著增强PMA分化的THP-1细胞杀伤胞内Gifu 10007菌(表1)。
2.3 IFN-γ对Gifu 10007菌诱导THP-1细胞产生细胞因子的调节 表2表明，Gifu 10007菌既不诱导THP-1细胞，也不诱导IFN-γ活化的THP-1细胞产生TNF- α，但可诱导PMA分化的THP-1细胞产生TNF-α，IFN-γ显著增强PMA分化的THP-1细胞诱导产生
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