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微量全血培养在HIV感染诊断中的应用 |
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吴守丽 严延生 洪思让 王家庄 王惠榕 梁红 郑兆双 郑健 陈舸 陈亮
摘要：［目的］ 建立一种简便、有效的HIV感染检测方法，用于儿童HIV垂直感染的早期诊断及可疑感染者的确认。［方法］ 用肝素化全血（每孔分别1000、 500、 250、 125、 62.5、 10 μl）与正常人激活的PBMC 106在24孔板中进行复孔共培养或与新鲜的正常人PBMC同时刺激共培养来分离HIV病毒，培养上清液用P24抗原ELISA试剂盒做检测。［结果］ 4例全血培养中分离出3株HIV-1，微量全血培养出现阳性的时间顺序为10 μl＞62.5 μl＞125 μl＞250 μl＞500 μl＞1000 μl。［结论］ 微量全血培养有较高的敏感性和特异性，能够用少量全血做出快速诊断，可应用于HIV-1垂直感染的早期诊断。
关键词： HIV分离； 微量全血； 细胞培养
中图分类号： R 512.91 文献标识码： A
文章编号：1007-2705(2000)05-0001-03
Diagnosis of Human Immunodeficiency Virus Infection by Small Volumes of Whole Blood Culture
WU Shou-li, YAN Yan-sheng, HONG Si-rang, et al.
(Fujian Centers for Disease Contral, Fuzhou 350001, China)
Abstract:［Objective］ To develop an easier and efficient method for the early diagnosis of HIV vertical infection and the identification of HIV suspected infection case. ［Methods］ Heparinized whole blood collected from HIV/AIDS cases was co-cultured with duplication in 24-well plates (1000、500、250、125、62.5、10 μl/well) with PHA-P-stimulated 106 PBMC from normal donors or with fresh PBMC that stimulated in the same time to isolate HIV. Cultured supernatant was detected by Vironostika HIV-1 Antigen Microelisa System. ［Results］ Three strains of HIV-1 were isolated from 4 cultures of whole blood. The time sequence of showing positive result was 10 μl＞62.5 μl＞125 μl＞250 μl＞500 μl＞1000 μl.［Conclusion］ Small volumes of whole blood culture is of higher sensitivity and specificity and can be used for the early diagnosis of HIV vertical infection.
Key words: HIV isolation; small volumes of whole blood; cell co-culture
近年来艾滋病已在全国范围内迅速蔓延开来，其主要传播途径为经静脉共用注射器吸毒为主的经血传播和性接触传播，1995年在云南省首次发现经母婴垂直传播的小儿HIV感染者［1］。随着育龄妇女HIV感染者的增多，通过母婴途径传播的儿童HIV感染率上升。由于母体被动IgG抗体存在的缘故，不能使用血清学诊断方法对2岁内的小儿进行HIV抗体检测，此外，用经典方法抽取大量的血液进行HIV病毒分离确认儿童感染有一定的难度。因此开展微量全血HIV分离培养技术用于小儿HIV可疑感染者的快速早期诊断以及病原学研究等势在必行，我们对微量全血HIV分离培养技术进行了研究，现将结果报告如[1] [2] 下一页
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