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2株分离的嗜人T细胞白血病病毒I型的PCR检测 |
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修文琼 牧野 正彦 下洼 敏 王欣 马场 昌范
摘要：［目的］ 用PCR法检测嗜人T细胞白血病病毒I型（HTLV-I）的分离情况。［方法］ 采集2例日本鹿儿岛县成人T淋巴细胞白血病(ALT)病人的肝素抗凝血，分离外周血单核细胞（PBMCs），加入植物血凝素和白介素-2，与健康人PBMCs共培养进行HTLV-I的分离，然后抽提DNA，用HTLV-I的gag1和tax1两引物进行PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳确定病原分离结果。［结果］ 2株都扩增出了HTLV-I前病毒DNA的gag1和tax1片断，证明了嗜人T细胞白血病病毒I型的分离成功。［结论］ PCR法是快速、准确检测嗜人T细胞白血病病毒感染的有效方法之一。
关键词： 嗜人T细胞白血病病毒（HTLV-I）； 前病毒； PCR
中图分类号： R 373； R 733.7 文献标识码： A
文章编号：1007-2705(2000)05-0006-03
uman T-Cell Leukemia Virus Type I Detected by Polymerase Chain Reaction
XIU Wen-qiong
(Fujian Centers for Disease Control, Fuzhou 350001, China)
SHIMOKUBO Satoshi, WANG Xin， et al.
Abstract： ［Objective］ To study on isolating Human T-cell Leukemia virus type I (HTLV-I) by polymerase chain reaction (PCR). ［Methods］ PBMCs from 2 heperinized blood specimens of ATL patients were collected and co-cultured with peripheral blood monocytes (PBMCs) donated by uninfected healthy donors with the presence of phytohemagglutinin (PHA) and interleukin-2 (IL-2). HTLV-I proviral DNA was prepared from CD4+ T cell by using the DNA extractor kit. The proviral DNA was amplified by PCR using primers gag1 or tax1. The amplified products were detected with agarose gel electrophoresis. ［Results］ We detected the 236bp bands of gag1 and 1058bp bands of tax1 by agarose gel electrophoresis and proved to separate the HTLV-I provirus successfully. ［Conclusion］ PCR is one of the useful methods to detect the infection of HTLV-I.
Key words: HTLV-I; provirus; PCR
HTLV-I病毒（Human T-cell leukemia virus type I or human T-cell lymphotropic virus type I）是80年代初新发现的一种重要病毒，可引起成人T淋巴细胞白血病（Adult T-cell leukemia, ATL），还可引起一些神经系统疾病，如HTLV-I相关的脊髓病（HTLV-I associated myelopathy, HAM）或热带痉挛性下肢轻瘫（Tropical spastic paraparesis, TSP），也可引起其它一些疾病。在世界许多地方都发现有HTLV-I的地方性流行。日本的西南部地区HTLV-I的感染率达8.1 %，而冲绳岛高达40 % 以上［1］。据估计世界上有1.5亿以上HTLV-I感染者［2］，日本的感染人数已有120万，但更多的感染者集中于西非和中非，大约有0.3～0.8亿［3］。美洲的感染者主要为印第安人，分布于加[1] [2] 下一页
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