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人白介素 |
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潘海燕 田竟生 王珂 赵春礼 郑少鹏 薛绍白
【摘要】 目的 对以人白介素-2在原代培养骨骼肌细胞中的表达作为肿瘤基因治疗模式进行新的探索； 方法 将人白介素-2 cDNA片段与CMV启动子及RSV启动子重组，通过Lipofectin介导将得到真核表达载体pCMV-IL2和pRSV-IL2转入原代培养的骨骼肌细胞，并用免疫组织化学方法观察白介素-2的表达； 结果 pCMV-IL2和pRSV-IL2经酶切鉴定正确，免疫组织化学观察到约有10%左右细胞表达了白介素-2cDNA； 结论 不同启动子表达情况并无差别，质粒DNA为今后肿瘤基因治疗提供了新的途径。
【关键词】 人白介素-2 骨骼肌细胞 脂质体介导的基因转移
THE HUMAN INTERLEUKIN-2 EXPRESSION IN PRIMARY
SKELETAL MUSCLE CELLS OF THE RAT
Pan Haiyan△, Tian Jingsheng, Wang Ke, Zhao Chunli, Zheng Shaopeng, Xue Shaobai*
(Beijing Institute for Neuroscience,Capital University of Medical Sciences,Beijing,
*Molecular and Cellular Program,Biology Department of Beijing Normal University,Beijing)
【Abstract】 Objective By using hIL2-muscle model to exploit a new gene therapeutics for cancer.Methods Two mammalian expression vectors were constructed,which contained 1kb human interleukin-2 cDNA,and were transfected into primary skeletal muscle cells of the rats mediated by lipofectin(hIL2-muscle model).The hIL-2 expression in primary muscle cells was detected by immunohistochemical stain method.Results Identification of pCMV-IL2 and PRSV-IL2 was confirmed by digesting with restrictive endonucleases,about 10% positive cells were observed and the expression level of pCMV-IL2 and pRSV-IL2 had no difference in the muscle cells.Conclusion Recombinant plasmid DNAs might be suitable for gene therapeutics for cancer.
【Key words】 hIL2; Muscle cells; Lipofectin mediated gene transfer
目前，对肿瘤的基因治疗研究正方兴未艾、发展迅速。肿瘤基因治疗中大约有1/3的方案是将细胞因子基因导入肿瘤细胞后作为肿瘤疫苗植入体内，以期持续分泌活性细胞因子来达到增强抗肿瘤免疫反应的目的［1］。在诸多细胞因子中，白介素-2(interleukin-2,IL2)是体内一种重要的参与免疫调节的细胞因子，也是肿瘤临床治疗中应用最早的细胞因子［2］。相反，由于IL2在血液中半衰期短，反复输入IL2会产生严重的毒副作用，因此用体内直接输入IL2的方法来治疗肿瘤有很大的缺点［3］。用IL2基因修饰的肿瘤细胞可以使之在肿瘤部位表达分泌，从而增加了IL2的靶向性，而且肿瘤疫苗还会诱导特异性的抗肿瘤免疫反应，故用IL2基因导入肿瘤细胞行肿瘤基因治疗有很好的前景。然而，以肿瘤细胞作为靶细胞也有许多不足之处［4］：肿瘤细胞自体建系困难，稳定的自体细胞系除了在黑色素瘤和肾癌患者中约30%病人可建立稳定的自体细胞系外，在其他患者尚未见成功，将永久性的细胞系回输体内有易于癌化趋势。因[1] [2] [3] 下一页
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