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超抗原诱导T细胞凋亡或增殖的体外研究 |
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宋建勋 朱锡华 陈克敏
摘 要 目的：研究抗原递呈细胞(Apc)在超抗原诱导人外周血特异性T细胞反应中的作用。方法：金黄色葡萄球菌A型肠毒素(SEA)刺激短期人外周血SEA反应T细胞系的作用中，通过去除或加入Apc，观察细胞形态、FCM检测细胞亚G0/G1峰(A0)大小及1.8%DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征条带。结果：SEA 1 μg/ml作用16 h，能明显诱导短期人外周血SEA反应T细胞系凋亡，Apc存在能抑制SEA诱导的T细胞凋亡，细胞处于增殖状态。结论：SEA对作用T细胞的结局(凋亡或增殖)决定于Apc的存在与否。
关键词 超抗原 T细胞 抗原递呈细胞 细胞凋亡 细胞增殖
中国图书分类号 R392.11 R364
In vitro study on T cell apoptosis or proliferation induced by superantigen
SONG Jian-Xun, ZHU Xi-Hua, CHEN Ke-Min.
Institute of Immunology PLA, The Third Miliary Medical University, Chongqing 400038
Abstract Objective:To investigate the effects of Apc on SAg-medicated T cell apoptosis or proliferation. Methods:A short-term SEA-specific T cell lines were established from human peripheral blood and the T cell apoptosis or proliferation induced by SEA in the prescence or absence of Apc were detected by using flow cytometry (FCM) and DNA electrophoresis of 1.8% agarose gel. Results:It was showed that the T cell proliferation in the presence of Apc and the T cell apoptosis in the absence of Apc when the T cell lines induced by SEA 1 μg/ml after 16 h. Conclusion: The T cell outcomes (proliferation or apoptosis)were decided by Apc in the presence or absence induced by SEA.
Key words Superantigen T cells Apc Apoptosis/PCD Proliferation
超抗原(Superantigen, SAg)是一种新型的蛋白质抗原分子，可以在MHCⅡ类分子非限制性辅助下，以TCRVβ特异性的方式激活比普通抗原多达数千倍的CD4+和CD8+T细胞，促使它们增生及分泌细胞因子［1］；然而，SAg在激活大量特异性T细胞之后，常常产生克隆缺失(Clonal deletion)或免疫耐受(Tolerance)而出现无反应性(Anergy)，其机理尚不清楚。许多研究发现，SAg在激活大量特异性T细胞后，可导致激活诱导的细胞死亡(AICD)，即T细胞凋亡，与SAg诱导的T细胞克隆缺失有关［2，3］。SAg主要分为两种，一种是病毒性内源性SAg，如小鼠乳腺肿瘤逆转录病毒(MMTV)产生的蛋白，另一种为细菌性外源性SAg，主要是革兰氏阳性细菌分泌的外毒素，如金黄色葡萄球菌产生的肠毒素(SE)、链球菌产生的致热外毒素等。本研究采用SAg中的SEA诱导人外周血中特异性T细胞系凋亡，观察了Apc在此诱导过程中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 主要试剂 SEA(1 mg，军事医科院产品)，rIL-2(10 000 U，全军分子免疫学重点实验室产品，批号971027)。淋巴细胞分离液(中国医科院血液研究所，批号970311)；Ficoll(上海试剂二厂，批号970809)。碘化丙啶(PI)、非离子去污剂Triton X-100(Sigma)、[1] [2] 下一页
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