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一氧化氮 内皮素和循环内皮细胞在支气管哮喘中的作用研究 |
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is of asthma. ET and CEC may be useful in forecasting the severity of illness.
MeSH Asthma; Nitric oxide; Endothelins; Endothelium; Cells; Child;Guinea-pigs
肺脏能释放内皮依赖性舒张因子(endothelium derived relaxing factor, EDRF)及内皮依赖性收缩因子(endothelium derived contracting factor,EDCF)，二者的动态平衡对于维持正常的气道张力及肺血管张力非常重要。目前已知：一氧化氮(nitric oxide, NO)是EDRF的主要活性成分，而内皮素(endothelin, ET)是EDCF的主要活性成分之一。NO具有血管及支气管舒张作用［1］，ET是强烈的血管及支气管收缩剂［2］。故我们推测NO及ET在支气管哮喘中可能具有重要的发病学意义。本文旨在测定正常儿童，支气管哮喘患儿血浆NO、ET、cGMP及循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CEC)水平，并在动物模型上进行验证，探讨NO及ET在哮喘发病机理中的作用。
对象和方法
一、研究对象及分组处理：
(一)临床研究：
1.对照组：健康儿童共40名，2～10岁(平均4.6岁)，其中男22名，女18名。均无哮喘病史，采血前4周内无感染及用药史。
2.哮喘组：确诊为支气管哮喘的本院住院患儿，均为急性发作期病人，轻中度哮喘46例，重度哮喘(哮喘持续状态)15例，共61例，其中男37例，女24例，年龄1～12岁(平均4.9岁)。住院次晨采外周静脉血样待测。
(二)动物实验研究：
体重为200～250 g健康幼年豚鼠24只 ，雌雄各半，随机分为3组，每组8只。
1.哮喘组：用10%卵白蛋白腹腔注射1.0mL致敏动物，2周后用1%卵白蛋白超声雾化吸入致其哮喘发作，出现喘息，呼吸困难和紫绀等。隔日诱喘1次，共10次，末次后于15min内采心脏血样品并摘取动物肺脏行支气管肺泡灌洗，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)6～7mL，置4℃ 3 000 r/min离心10min后，取上清液待测。
2.哮喘+氢化可的松组：诱喘方法同上，在每次诱喘前腹腔注射氢化可的松0.5mg/100g。
3.对照组：用生理盐水(normal saline, NS)做对照，方法同哮喘组。
二、检测方法：
(一)NO水平测定：NO-2/NO-3是NO的稳定代谢产物，是反映NO产生水平的良好指标。检测其浓度以代表NO水平［3］。
(二)ET及cGMP水平测定：采用特异性放射免疫分析法测定(试剂盒分别由解放军总医院及上海医科大学提供)，按说明书要求操作。
(三)CEC水平测定：见参考文献［4］。
三、统计处理：
结果以均数±标准差(±s)表示，哮喘患儿组间比较用t检验；动物实验结果行方差分析，组间q检验或t检验作统计处理，并做直线相关分析。
结果
一、轻中度哮喘患儿血浆NO-2/NO-3、ET、cGMP及CEC水平：
轻中度哮喘患儿血浆NO-2/NO-3、cGMP和CEC水平均显著高于正常儿童(P＜0.05～0.01)，而ET水平与健康儿童比较无明显差异(P＞0.05)(见表1)。
二、重度哮喘患儿血浆NO-2/NO-3、ET、cGMP及CEC水平：
重度哮喘患儿血浆NO-2/NO-3、ET、cGMP及CEC水平均显著高于正常儿童(P＜0.01)，且NO-2/NO-3、ET及CEC水平明显高于轻中度哮喘患儿(P＜0.01)，而cGMP水平在重度与轻中度哮喘患儿之间比较无明显差异(P＞0.05)(见表1)。
表1 哮喘患儿血浆NO-2/NO-3、ET、cGMP及CEC水平
Tab 1 Levels of NO-2/NO-3,ET,cGMP and CEC in the plasma of asthmatic children (±s)
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