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实验性急性肝衰竭时门脉高压发生机制的研究 |
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体重ip)麻醉后，经腹正中切口暴露门静脉，用MFV-3100型(日本NIHON KOHDEN公司)电磁流量计测定门静脉血流量(PVF)。穿刺回结肠静脉，接压力换能器(TP-400T型)，用四道生理记录仪(日本NIHON KOHDEN公司)测定门静脉压力(PVP)。
(三)内毒素及生化指标测定：
1.血浆内毒素含量测定：采用改良过氯酸法，试剂盒由上海市医学化验所提供。
2.血浆及肝匀浆中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)含量测定：应用放射免疫分析法。试剂盒由东亚免疫研究所提供。
3.血浆丙氨酸转氨酶(alanine transaminase, ALT)活性测定：采用赖氏法。
4.血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活性测定：试剂盒由上海长征医学科学有限公司提供。
(四)台盼蓝肝脏原位灌流：按文献［3］进行，但灌流速度改为4 mL/g liver.min-1，记录肝脏全部均匀蓝染时间。
(五)病理组织学观察：经HE染色的肝组织切片用MIAS-300型图像分析仪测量肝窦直径的变化。
(六)统计学处理：数据以均数±标准差(±s)表示，采用方差分析，q检验，并对有关指标进行相关与回归分析。采用SPSS＋／PC4.0通用软件进行。
结果
一、门脉血流动力学的变化：
如表2所示，TAA皮下注射6 h后，PVF明显减少(P＜0.05)，随着时间的延长，PVF呈进行性降低，36 h组降低至正常组的大约1/3。而PVP则随TAA皮下注射时间的延长逐渐升高，36 h组升高至约为对照组的2倍，组间相比均有显著差异(P＜0.05)。
二、血浆内毒素含量变化：
随着注射TAA时间的增加，血浆内毒素含量逐渐升高，24 h、36 h组均与正常组有显著差异(P＜0.05)，见表1。
三、血浆及肝匀浆TNF-α含量变化：
注射TAA后血浆TNF-α含量明显升高，36 h组约为正常对照组2倍；肝匀浆中TNF-α含量变化趋势与血浆变化一致，只是升高速度更快，24 h组约达到正常对照组2倍，36 h组约达3倍(表1、3)。
表1 血浆内毒素及生化指标的动态变化
Tab 1 The dynamic changes of plasma endotoxin and biochemistry (±s)
Group n ALT
(U/L) Endotoxin
(×103U/L) TNT-α
(μg/L) ET-1
(ng/L)
N 6 63.83±23.96 0.156±0.010 0.65±0.12 107.12±14.73
6 h 6 101.24±58.52 0.216±0.056 0.89±0.10a 119.35±15.02
12 h 6 103.02±20.26a 0.195±0.033 0.90±0.17a 120.70±26.64
24 h 7 1497.36±575.94abc 0.249±0.036a 0.98±0.08a 150.91±58.27a
36 h 7 3365.72±494.60abcd 0.265±0.024a 1.23±0.25abcd 164.68±46.72abc
a:P＜0.05, vs N; b:P＜0.05 vs 6h; C:P＜0.05 vs 12 h;d:P＜0.05, vs 24 h;
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