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睾丸摘除后大鼠垂体前叶CGRP免疫反应神经纤维的变化 |
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were more larger. Student s t-test showed that the difference of the average area density of the CGRP-immunoreactive nerve fibers in the AP between OX and NOR was significant. The difference of that between OX＋V and NOR was also significant. But the difference of that between SO,NOR＋TP,OX＋TP,NOR＋V and NOR was insignificant, whereas the appearance of the CGRP-immunoreactive nerve fibers of NOR＋TP and OX＋TP was different from that of NOR, with the former two had more thin fibers and less thick fibers.Conclusion The results demonstrated that CGRP-immunoreactive nerve fibers in the AP of the rat could respond actively to the violent change of circulating TP, suggesting that CGRP-immunoreactive nerve fibers might regulate secretion of the AP gland cells.
【Key words】 Anterior pituitary; Calcitonin gene-related peptide; Nerve Fibers; Orchiectomy; Rat
近年来，在一些哺乳动物垂体前叶中陆续发现了一定数量的SP及CGRP免疫反应神经纤维的分布［1～7］。免疫电镜研究发现犬垂体前叶CGRP免疫反应神经纤维与各种腺细胞联系密切，并可与ACTH细胞、GH细胞形成典型的不对称的突触结构［8］，推测该神经纤维可能对ACTH、GH的合成与分泌具有调节作用。功能形态学和激素替代实验表明，对大鼠行双侧肾上腺摘除术后，垂体前叶中的CGRP免疫反应神经纤维数量显著增多，说明CGRP免疫反应神经纤维对机体的内分泌状态的变化产生了积极的反应［9］，提示CGRP免疫反应神经纤维可能对垂体前叶的分泌发挥一定的调节作用。本研究观察了睾丸摘除后，大鼠体内雄性激素水平剧烈变化时，大鼠垂体前叶中CGRP免疫反应神经纤维的变化。
材料和方法
1. 动物
成年雄性SD大鼠56只，体重200～230g，由第四军医大学动物实验研究中心提供。随机分为7个组，每组8只：(1)正常对照组(NOR)，(2)双侧睾丸摘除组(OX)，(3)假手术组(SO)，(4)正常＋丙酸睾丸素组(NOR＋TP)，(5)睾丸摘除+丙酸睾丸素组(OX+TP)，(6)正常+油剂组(NOR+V)，(7)睾丸摘除＋油剂组(OX＋V)。
丙酸睾丸素的给药量为每日每只130μg(皮下注射)，溶于芝麻油(0.2ml／只)，于睾丸摘除次日开始给药。正常给药时间与摘除组给药时间同步，给药时间为每日17:30～18:00。给油剂时间与给药时间同步。饲养条件为12h光照(8:30～20:30)，12h黑暗。给予足够的食物和饮水。
2. 取材
睾丸摘除后7d取材，取材时间为上午9:00～11:00，经升主动脉灌注100ml生理盐水及新鲜配制的4％多聚甲醛PB溶液(0.1mol／L,pH7.4)500ml，4℃，1h后取出垂体，在4℃、4％多聚甲醛PB溶液中后固定2～4h，入20％蔗糖PB溶液中，4℃过夜。为保证所有动物均在同一时间固定，每组实验相差1d。
3. 免疫组织化学方法
恒冷箱连续矢状切片，片厚30μm ，贴片于经1％明胶＋0.05％硫酸铬钾处理过的载玻片上；在空气中干燥15min后，入0.01mol／L的KPBS(pH7.4)，经100％甲醇＋0.3％H2O2封闭内源性过氧化物酶，KPBS浸洗3×5min，浸泡于0.3％Triton X-100中30min，切片入兔抗CGRP血清(1:4 000，美国Salk Institute，W.Vale博士惠赠)，抗体上一页 [1] [2] [3] 下一页
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