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人胎盘泌乳素乳胶诊断试剂盒的研制 |
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王晓东 李立梅 周连福 由家惠 李玉珍 付平平 王彦忠
中国图书分类号 R446.6
摘 要 目的：根据聚苯乙烯乳胶对蛋白质的良好吸附性能，通过对乳胶的化学改性，使其能够同人胎盘泌乳素(Human placetal lactogen，HPL) 抗血清牢固联接。方法：利用乳胶作为联接HPL抗血清的载体，同孕妇血清进行凝集反应。根据血清的稀释倍数，半定量测定出HPL的浓度。结果：经过对183例足月孕妇血清测定，并同时与单向免疫扩散法做相关性比较，两者呈高度相关，相关系数r=0.611，P<0.001。结论：此方法可以作为围产期检查胎盘功能的一种新方法。
关键词 人胎盘泌乳素 围产期 胎盘功能
Development of diagnosis kit for human placental lactogen (HPL) by latex
WANG Xiao-Dong,LI Li-Mei，ZHOU Lian-Fu et al
(Family Planning Institute of Jilin Province,Changchun 130041)
Abstract Objective：According to the property of polystyrene latex that can adsorb Proteins perfectly anti-HPL serum was combined with latex that was modified Chemically. Methods：Latex that was linked with anti-hpl serum can act as a carrier that will agglutinate when it reacts with pregnancy serum. The concentration of HPL will be analyzed half quantitatively by serum dilution. Results：We analyzed 183 cases pregnancys serums using latex agglutination and immunodiffusion .The results show that these two methods have high correlations, the correlation coefficient r=0.611(p<0.001). Conclusion：Indicated that the latex agglutination kit could be a new method to detect peripartum placental function.
Key words Human placental lactogen Perinatology Placental function
自1956年Singer和Ploz首次报道以乳胶为载体建立免疫学诊断方法以来，乳胶凝集作为快速检查方法，深受使用者欢迎。但由于乳胶本身的局限性和空间位阻效应，使免疫活性物质不能有效充分结合到乳胶表面［1］。所以目前国内多为联接抗原的乳胶凝集抑制试验，而能够联接抗体的乳胶报道甚少。经资料查询国内未发现乳胶直接凝集试剂盒产品。我们经过多年的试验研究，采用化学修饰的方法，使合成的乳胶表面带有活泼脂基团，可直接同抗血清联接，方法简单实用，并且成功地将人胎盘泌乳素（HPL）抗血清联接到乳胶上，生产出HPL乳胶诊断试剂盒，现将实验报道如下。
1 材料与方法
1.1 主要试剂 Strrene 苯乙烯（国产），MES、2-N-吗啡啉-乙磺酸（Serva公司），SDS、十二烷基磺酸钠（Sigma公司），EDC、水溶性碳化二亚胺（Sigma公司），HOBT、N-羟基苯丙三氮唑（Sigma公司）。
1.2 HPL的提纯及抗血清的制备 应用正常足月产妇胎盘, 经组织捣碎、离心、盐析、柱层析、亲合层析等手段，将HPL提纯，然后按常规方法免疫家兔，制备HPL抗血清［2］。
1.3 羧化聚苯乙烯的合成 应用3口圆底瓶，加入去离子水，在88℃水浴中300 r/min，恒温搅拌，加入SDS，待溶后按比例依次加入无阻聚剂的苯乙烯纯品、MES，连续搅拌6 h，由苯乙烯的汽油味变成杏仁味即为聚合完毕，合成[1] [2] 下一页
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