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三个家猪品种和rob易位群染色体分带多态性的比较 |
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>Key words: Domestic pig;Chromosome C-band;Ag-NORs polymorphism
染色体易位纯合子猪是孙金海等人1991年在国内外首次通过13/17染色体易位杂合子猪互交而获得的一种新遗传类型家猪, 2n=36，XY或XX rob（13/17）。家猪染色体研究的报道虽然很多，但多数是针对一个品种或几种带型的研究〔1〕。本研究目的在于用长白猪、约克夏猪、杜洛克和13/17易位猪群染色体分带的多态性比较研究，来系统地探讨家猪品种及家系间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料来源
本实验共用家猪28头，雌雄各半，其中杜洛克猪4头，约克夏猪4头，长白猪4头，13/17易位纯合×约克夏杂一代8头，均来源于吉林长春华龙种猪场。13/17易位纯合猪4头，13/17易位杂合猪4头来源于中国人民解放军农牧大学实验牧场。
1.2 实验方法
1.2.1 外周血淋巴细胞培养 参照王子淑报道的微量全血淋巴细胞培养法〔2〕。
1.2.2 染色体常规染色及测定 指标采用Giemsa常规染色，选10个中期细胞用放大2 500倍的显微照片进行染色体测量，计算方法如下：着丝粒指数= (短臂长度/染色体长度)×100
1.2.3 C－分带染色C-带判定 采用Sumner (1972) 的方法〔2〕。多态性判定按照Hansen (1972）的方法，即不同动物间某对同源染色体出现某种类型的频率若高于2/3，就认为该对同源染色体不表现多态性。
1.2.4 硝酸银染色 采用快速银染色法〔3〕。
1.2.5 Ag-NORs测定指标 各品种观察200个细胞，选择分散好、银染清晰、染色体数目完整的细胞进行分析。对有Ag-NORs的染色体统计其银染颗粒；比较个体间、品种间的差异及其程度。
2 结果
2.1 染色体数目
杜洛克、约克夏、长白3个品种猪染色体数均为：雄性2n=38，XY；雌性2n=38，XX。而13/17易位杂合猪染色体数目为雄性2n=37, XY；雌性2n=37，XX。13/17易位纯合猪染色体数目为雄性2n=36，XY；雌性 2n=36，XX。
2.2 C-分带
对5种家猪体细胞染色体的观察表明，端着丝粒染色体C-带可表现为大、中、小3种类型。χ2检验结果表明，不同对同源染色体C-带的大小在品种间差异显著(P<0.05)。5种家猪C-带着色深浅不同，大小各异(图版I 1)，呈现多态性。具体结果见表1。13/17易位染色体着丝粒处显著深染，表明易位染色体是由13号与17号染色体着丝粒融合产生的并在其深染处有大量结构异染色质分布(图版I 1)。
1.13～18号染色体C带多态;
表1 家猪染色体C-带多态性
猪品种 观察细胞数 同源染色体对
13 14 15 16 17 18
杜洛克猪 10 - - + + - +
约克夏猪 10 + + + - - +
长白猪 10 - - - + - +
13／17易位杂合猪 10 - + + - - +
13／17易位杂合猪 10 - + + + +
注: +.表示有多态性;-.表示无多态性。
2.3 Ag-NORs的多态性
通过银染处理发现，各种猪的Ag-NORs均出现于8号或10号两对染色体的次缢痕区，且具有明显的多态性，主要表现在：
2.3.1 品种间Ag-NORs分布多态性 本研究所观察到的细胞中期分裂相中, Ag-NORs出现数目有2、3、4个之区别（图版I 2～4），由表2可见, 品种不同，Ag-NORs的分布和数目各异，说明Ag-NORs具有品种特征。
2.2Ag-NORs;3.3Ag-NORs;4.4夾g-NORs。
表2家猪不同品种单个细胞Ag-NORs的分布
品种 头数 统计细胞总数 1个Ag-CNORs(%) 2个Ag-CNORs(%) 3个Ag-CNORs(%) 4个Ag-CNORs(%) X±S 众数
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