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恶性疟复合多价抗原基因在小鼠中免疫应答的初步研究 |
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黄建生 张丽芸 郭明秋 王昌才 任大明
【摘要】 目的 探索恶性疟复合多价DNA疫苗的可行性。方法 把带有ATG的接头与人工合成的恶性疟原虫复合多价抗原基因AB相连后，构建分别带有SV40或RSV启动子的真核表达载体pSV2/AB及pREP9/AB,重组表达质粒经肌肉注射免疫BALB/c小鼠后，检测其诱发特异性体液和细胞免疫应答水平及毒副作用。结果 pSV2/AB及pREP9/AB免疫BALB/c小鼠后均诱发了一定水平的细胞及体液免疫应答,带RSV启动子的pREP9/AB免疫原性略强于带SV40启动子的pSV2/AB, DNA免疫后未见明显的毒副作用。 结论 恶性疟复合多价DNA疫苗可诱发特异的免疫应答,为疟疾DNA疫苗的研究提供了一定的理论及实验依据。
【主题词】 DNA疫苗 疟原虫，恶性 复合多价基因
Immunogenicity of multivalent antigen gene of Plasmodium falciparum in BALB/c mice Huang Jiansheng, Zhang Liyun, Guo Mingqiu,et al.Institute of Genetics,Fudan University, Shanghai 200433
【Abstract】 Objective To study the possibility of multivalent DNA vaccine of P. falciparum. Methods A multivalent gene AB of P. falciparum was ligated with a 18bp linker,then cloned into the eukaryotic vectors pSV2-neo or pREP9,which possessed SV40 or RSV promoter respectively.The recombinant plasmids pSV2/AB and pREP9/AB were then intramuscularly injected to BALB/c mice, and the specific humoral and cellular immunity and its side-effects were tested. Results The two recombinant plasmids DNA could induce specific immune reactions without obvious toxicity,which showed that the immunogenicity of pREP9/AB was better than that of pSV2/AB. Conclusions The multivalent DNA vaccine of P. falciparum could induce specific immune reactions,which might have provided some new experimental data for the further research of malaria vaccines.
【Subject words】 DNA vaccine Plasmodium falciparum Multivalent gene
DNA疫苗兼有亚单位疫苗的安全性及减毒活疫苗诱导全面免疫应答的高效性，为亚单位疫苗的研究提供了一条崭新的途径，已成为疫苗研究的热点之一〔1〕。我们根据Patarroyo等报道的恶性疟原虫复合SPf66及SPf105多肽序列，人工合成的复合多价抗原基因AB已经在大肠杆菌及减毒鼠伤寒沙门氏菌中获得高效表达〔2，3〕。现把该基因重组到真核表达载体pSV 2-neo(带SV40启动子)及pREP9(带RSV启动子)中，构建pSV2/AB及pREP9/AB重组表达载体，并研究恶性疟复合多价抗原基因在小鼠中的免疫应答情况。
材料与方法
1. 菌株与质粒:E.coli TG1 为复旦大学遗传学研究所国家重点实验室保存菌种，质粒pWRAB、pWR450-1、pSV2-neo及pREP9为第一军医大学分子生物学研究所提供。
2. 酶:限制性内切酶、T4 DNA连接酶、T4多核苷酸激酶均购自Promega公司。
3. 接头:带有ATG的18bp接头为中山医科大学基因诊断[1] [2] 下一页
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