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异型反应性CD4 T淋巴细胞在MHC |
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Mixed Lymphocyte Reaction(MLR), Cytotoxity T Lymphocyte(CTL)were measured .Statistics was done with students test. Results The mice B6Kbm1 skin grafts were rejected by B6CD8-/-mice (21.9±1.9 days); by contrast , B6CD8-/-experiments depleted of CD4+ T cells in vivo accepted the MHC class-I disparate skin(>47.5±13.8 days) . In B6CD8-/- mice with B6Kbm1 skin grafts ,generation of CD4+ T cells were distinct (12356.0±1325.7),and were restrained if the mice had been depleted of CD4+T cells by anti-CD4 antibody(GK1.5) in vivo and in vitro(827.3±198.2).The generation of CD4-CD8-αβTCR+ T cells (DN) were detected, and also were reduced by anti-CD4 antibody. Conclusions Alloreactive CD4+ T cells can indeed initiate MHC class-Ⅰ disparate skin allograft rejection without CD8+ T cells and offer a help to CTL(CD4+ or/and DN T cells)in CD8-/- mice in vivo . It demonstrates that this indirect allo-recognition path is an important role in the transplantation rejection.
【Subject words】 Allorejection Antigen,CD4 MHC-Ⅰ disparate antigens
主要组织相容复合物(MHC)及其产物是同种移植排斥反应中的重要标志〔1〕。 目前认为T细胞识别MHC-Ⅰ类移植抗原通过两种途径：“直接途径”,CD8+T细胞直接识别由供体抗原提呈细胞(APC)提呈的I类抗原;“间接途径”,CD4+T细胞识别由受体APC提呈的I类抗原〔2〕。许多离体实验已证实CD4+T细胞的确能识别与MHC-Ⅱ类分子结合的Ⅰ类抗原〔3-9〕 ，但在体内是否能导致MHC-Ⅰ类分子差异的异体移植物的排斥反应，尚未见报道，现将在体内的实验研究报告如下：
材料和方法
1.实验动物：C57BL/6, B6: H-2b:Kb,Db,I-Ab。DBA: H-2d:Kd,Dd,I-Ad。CD8-/-小鼠：B6,H-2b:Kb,Db,I-Ab ,CD8-/-。B6 Kbm1小鼠：Kbm1:H-2bm1:Kbm1,Db,I-Ab。由日本九州大学医学部实验动物中心及生体防御研究所提供。小鼠6～9周龄,体重20～25g，雌性。
动物特性： CD8-/-小鼠：因CD8基因被剔除而致体内缺乏CD8+T细胞，体内>99%的T细胞为CD4+T细胞，同时细胞上MHC-Ⅰ类分子表达弱，体外实验中杀伤性T细胞功能低(CTL)〔10，11〕。 Kbm1小鼠：是在MHC-Ⅰ类分子K区上有三个氨基酸发生变异的C57BL/6；它们是152位点上谷氨酸突变成丙氨酸，155位点上精氨酸突变成酪氨酸，156位点上亮氨酸突变成酪氨酸，从而使Kbm1与B6 间仅仅是MHC-Ⅰ类分子不同〔12〕。
2.皮肤移植：参照Billingham和Medawar法改良〔13〕。将供体(Kbm1)全厚尾部皮肤（1×1cm2）移植到受体B6或B6CD8-/-小鼠背部偏右，于移植后第8天拆除包扎，观察移植皮肤片鲜嫩无脱落被认为移植成功，常规喂养，每日观察，若出现皮肤片失去光泽，变硬，脱落或脱离皮肤创面达90%以上时即为被排斥。为了消灭体内CD4+T细胞，采用腹腔注射的方法 ，将GK1.5〔14上一页 [1] [2] [3] 下一页
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