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皮质醇导致脓毒症大鼠TNF |
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tic fluid were significant higher than that in plasma in all groups (P＜0.01). 3. No significant differences in IL-6 level were found in plasma and ascitic fluid between A,B,C ,D and E groups (P＞0.05). CONCLUSION: Treatment to septic rats with cortisol made a significant increase of TNF-α level in plasma. Animals with elevated TNF-α level had a higher rate of death.
MeSH Inflammation; Hydrocortisone; Tumor necrosis factor; Interleukin-6
虽然糖皮质激素在创伤、炎症、休克时有抑制炎性介质生成和释放的作用［1］，但迄今尚无资料显示糖皮质激素对炎性细胞因子有明显的抑制作用。临床上应用皮质激素治疗严重感染或脓毒症也未取得确切疗效。为此，我们采用大鼠盲肠结扎穿孔（cecal ligation perforation，CLP）脓毒症模型，观察皮质醇对脓毒症大鼠细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响及可能的治疗作用。
材料和方法
动物分组：二级SD大鼠58只、体重155～210 g，由中山医大动物中心提供，分为A、B、C、D、E 5组，每组雌雄各半。A组：（CLP48h+hydrocortisone）14只，CLP术毕即刻及每12 h皮下注射氢化可的松（hydrocortisone 江苏扬州制药厂）30 mg/kg，观察48 h；B组：（CLP48 h＋NS）14只，CLP术毕即刻及每12 h皮下注射等量生理盐水6 ml/kg，观察48 h；C组：（CLP24 h＋hydrocortisone）10只，模型制作及氢化可的松应用同A组，仅观察24 h；D组：（CLP24 h＋NS）10只，模型复制及生理盐水注射同B组，观察24 h；E组为对照组，10只，不复制CLP模型，仅行开腹术。术毕即刻及每12 h皮下注射等量生理盐水6 ml/kg，观察48 h 。
模型复制参照Flammand等［2］的方法。实验前动物禁食12 h，自由饮水，用戊巴比妥钠（40 mg/kg ip）麻醉，无菌操作，腹正中切口2 cm进腹，于盲肠出口处用4号线结扎，14 G套管针将盲肠贯通穿孔一次，穿孔为两个，还纳肠管于腹腔，间断缝合腹壁。A组1例、B组3例因麻醉死亡，不纳入实验观察，动物置22 ℃恒温消毒间饲养，自由进食进水。C、D组于24 h，A、B、E组于48h心脏穿刺采血活杀。开腹采集腹腔液，血及腹水均采用肝素20 U/mL抗凝，3000 r/min 离心10 min分离上清-70 ℃冻存，备测TNF-α、IL-6和皮质醇含量。
皮质醇测定采用放射免疫法（RIA）（北京北方生物技术研究所）单位nmol/L；TNF-α 采用ELISA方法（BioSource，美国）；IL-6采用ELISA方法（Genzym，美国）。统计处理采用非参数方差分析、配对资料t检验和非参数相关分析，由SPSS统计软件处理，数据以表示。
结果
A组3例于24～36 h死亡，死亡率为23%（3/13），B、C、D、E组在观察时间内均无死亡。A组血浆皮质醇水平为(53.5±32.2) nmol/L（n=10）；C组血浆皮质醇水平为(38.7±19.3) nmol/L（n=10），统计处理显示A组血浆皮质醇水平显著高于C组(P＜0.01）。B、D、E 3组血浆均检测不出皮质醇含量。
一、TNF-α含量分析（表1）：
表1 脓毒症大鼠 TNF-α含量分析
Tab 1 The content of TNF-α in plasma(P) and peritoneal fluid(PF) in septic rats （ng/L, n=8）
A B C D E
P-TNF-α 22.5±19.7# 4.5±8.8 5.8&plusm上一页 [1] [2] [3] 下一页
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