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rosclerosis,As)的防治是心血管领域重大课题之一。近年来,临床和动物实验针对As病因多、病程长、病变复杂的特点,设计了相应的防治措施[1],但临床上仍未达到满意的效果。研究发现:L-精氨酸-一氧化氮通路与动脉粥样硬化有关,并可能通过多种环节发挥抗As作用[2]。作者近期研究了饮水补充2.25%L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对实验性鹌鹑As病变预防作用[3],本研究拟在此基础上进一步探索L-Arg对As斑块的消退作用。
材料和方法
一、动物与分组: 采用南岳制药厂提供的雄性日本鹌鹑80只(体重70-90 g),在实验条件下给予基础饲料(含0.43%胆固醇及0.51%饱和脂肪酸)观察1周,基础饲料为市售鸡饲料,由沈阳嘉荣畜牧饲料有限公司提供。然后按体重随机分为4组,每组20只。(1)正常对照组:基础饲料;(2)高脂组:前8周、后8周一直高脂饲料(基础饲料+1%胆固醇+3%猪油);(3)L-Arg组:前8周高脂饲料,后8周基础饲料+2.25%L-Arg;(4)安慰剂组:前8周高脂饲料,后8周基础饲料,L-Arg溶于自来水中,配成2.25%浓度,自由饮水。8周末随机处死一半动物,剩余动物16周末处死。 二、血清生化指标检测: 鹌鹑饲养8周、16周后,禁食1夜,断头处死,收集全血标本作血清生化分析。血清总胆固醇(tatal cholesterol,TC)用硫-磷铁法测定,丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性按南京建成生物工程研究所MDA、SOD试剂盒的方法检测。 三、主动脉斑块病理学检查: 每组20只动物取出全部主动脉标本,沿纵轴剪开,苏丹IV染色,九方格计数,求出全部病变面积百分比。全部动物从主动脉弓同一部位取下0.5 cm,常规固定、脱水、包埋、切片、HE染色,光镜下形态学观察。另作横断面连续切片,厚4~5 μm,每隔10张取1张,每条血管标本取5张,采用Weigert氏法弹力纤维染色,以测微计在光镜下计算内膜厚度,每条血管标本计算5张切片,取其平均值。 四、统计学处理: 数据以表示,各组比较采用方差分析。
结果
一、血清TC、MDA浓度和SOD活性测定: 鹌鹑高脂组血清TC、MDA浓度明显高于正常对照组,SOD活性水平明显低于正常对照组。L-Arg组血清TC、MDA浓度接近正常对照组水平,而SOD活性水平则高于高脂组约400%,高于安慰剂组90%。安慰剂组血清TC、MDA浓度分别低于高脂组45%和50%,而高于正常对照组158%和106%;血清SOD活性水平则高于高脂组1.5%,低于正常对照组56%。各组间两两比较,差别显著(P<0.05),见表1。
表1 血清TC、MDA浓度和SOD活性水平 Tab 1 Content of TC, MDA, SOD in serum (,n=10)
Group TC(g/L) MDA(μmol/L) SOD(×103UN/L)
8 weeks 16 weeks 8 weeks 16 weeks 8 weeks 16 weeks Control 2.9±0.5 13.3±0.8 16±4 17±5 113±5 120±9 High lipid 3.3±3.4 15.5±3.8 58±10 70±12 30±5 20±8 L-Arg 12.8±0.4 3.6±0.6** 60±8 21±3** 31±4 101±8** Vehicle 13.0±1.3 8.5±1.1*△ 58±13 35±9*△ 28±7 53±8*△
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