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伽玛刀不同剂量照射正常大鼠一侧尾壳核后延髓内Fos蛋白的表达及变化 |
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nferior olive nucleus.With the dosage increasing,both the number and distribution scope of positive nucleus was increased.In the high dosage group,three types of Fos positive expression appeared in ventrolateral medulla oblongata nucleus.The three types were:only the nucleus was stained;only cytoplasm was stained;both nucleus and cytoplasm were stained.Conclusion Though a local nucleus in the forebrain was exposed to gamma knife,the distant area of middle-caudal segment of the medulla oblongata showed Fos positive reaction and the reaction was positively related with dosage.
Key words：Gamma knife;Medulla oblongata;Fos;Medullary visceral zone;Immunohistochemistry▲
γ-刀定位照射是某些颅内疾病(脑血管畸形、脑肿瘤及脑功能性疾病)的非手术治疗方法之一。有关γ-刀的放射神经生物学的基础研究虽有一些报告，但仍比较薄弱，Kandziolka等［1～3］曾做过比较系统的观察，他曾用γ-刀(30、40、50、60、70、80、100、150、200Gy)定位照射一侧尾状核头部，动物成活90d后靶区的组织学变化，结果照射剂量少于70Gy，在光镜下未见到组织学的改变；在70～100Gy发现神经元的大小与形态有变化，小动脉壁增厚，血红细胞或蛋白渗出血管外，并有点状坏死；150～200Gy照射后1～7d脑未出现病理学改变，14d出现靶区的脑水肿，21d后靶区出现一直径为4mm的坏死。这一结果初步提示了靶区脑组织的变化与剂量及成活时间的关系，由于他们只是用组织学方法仅观察了靶区组织的变化，说明的问题很局限，因此有必要对γ-刀照射正常大鼠脑部后，脑组织的变化进行更深入的研究。为此我们进行了两方面的工作，第1用100Gy剂量的γ-刀照射正常大鼠一侧尾状核头部，动物分别成活0.5、1、3、6、12h及1、3、7、14、30和90d后，采用组织学方法(HE染色)，组织化学方法(NADPH-diaphorase染色)，抗Fos蛋白，抗GFAP，抗0x42，和抗HSP70等免疫组织化学技术，观察全脑(包括靶区和非靶区)血管内皮，神经元，星形胶质细胞和小胶质细胞的变化及其与时间的效应关系。第2用10、20、30、40、50、60、70、80、90和100Gy的γ-刀照射正常大鼠一侧尾状核头部，动物均成活90d，采用上述方法观察全脑组织的变化及其剂量的效应关系。
我们仅就用10Gy至100Gy不同剂量的γ-刀照射后延髓内Fos蛋白的表达及变化作一报告，其他结果另行报告(请参阅“全国首届微侵袭神经外科学术会议论文汇编”，广州，1998：66～119)。
材料和方法
共用SD成年雄性大鼠(体重200g)34只，其中实验组30只，对照组4只。
1.实验组
1.1 γ-刀照射：在戊巴比妥钠(40mg/kg,腹腔注射)麻醉下，大鼠被固定于γ-刀专用固定架上(自己设计)，用磁共振成像(MRI)进行脑冠状面的连续扫描，扫描图像传至γ-刀控制计算机，确定将照射靶区定于尾状核前部的X.Y.Z的座标。然后将大鼠固定架按确定座标安放在γ-刀定位架上，用4mm准直器，对脑组织实施照射，中心部位剂量分别为10、20、30、40、50、60、70、80、90和100Gy等10个剂量级，每一剂量级3只大鼠。
1.2 组织材料的处理：照射后动物饲养在避光、温暖、水和食物充分的环境，均存活3个月，动物在戊巴比妥钠深麻下，按常规灌流固定。用恒冷箱切片机切制大脑的连续冠状切片(片厚30μm)，切片收集于冷PBS中。
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