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奥替普拉和反义GST |
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，快提鉴定。GST-π cDNA计算机读码分析，以确定酶切鉴定用的合适酶切位点。
2.2 GST活性测定：(1)样品制备：PBS洗细胞，刮下，破碎，4℃离心；(2)样品蛋白含量测定：求标准曲线，取样品100μl加入碱铜-酚试剂，测OD750；(3)GSTs活性：取0.2mol/L磷酸缓冲液2ml，加底物20mmol/L CDNB 500μl；20mmol/L GSH 50μl，样品100μl，测OD340;(4)GST-π测定(ELISA法)：用小鼠单抗MAbⅢ，BSA包被，加样品或抗原标准，加多抗，再加驴抗兔IgG-碱性磷酸酶，加PNPP，最后加3 mol/L NaOH，酶联免疫仪测OD410值；计算各样品GST-π含量(μg/L)，以蛋白含量为基准换算成GST-π实际含量(μg/L protein)。
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