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肿瘤坏死因子 诱导淋巴细胞化学发光及其增殖的研究 |
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俞越汉 丁鸣 马志章 王君晖 钱凯先 丁仁瑞
摘 要 目的:探讨活性氧参与rhTNFβ诱导淋巴细胞活化作用的机理。方法：采用化学发光(CL)和顺磁共振法(ESR)研究rhTNFβ诱导人外周血淋巴细胞产生活性氧(OR)的动态变化及其增殖作用。结果：①用10～2 000 U/ml的rhTNFβ处理1×106 ml-1淋巴细胞均可诱发Ly-CL,其中以100 U/ml rhTNFβ处理18～20 min的CL峰值(RLI)为最高，所诱发的OR主要为OH.；②以15～62 U/ml的rhTNFβ处理淋巴细胞72 h,可明显地产生活化效应，这与TNFβ诱发淋巴细胞早期产生Ly-CL的强度相一致。结论：适当剂量的rhTNFβ可诱导人外周血淋巴细胞产生OR并促进其增殖。
关键词 重组人肿瘤坏死因子β 淋巴细胞 化学发光 顺磁共振
中国图书分类号 R392.12
Study on the chemiluminescence and proliferation of
lymphocyte induced by rhTNFβ
YU Yue-Han, DING Ming, MA Zhi-Zhang et al.
College of Life Science, Hangzhou University,Hangzhou 310012
Abstract Objective:Study on the mechanism of lymphocyte s activation induced by rhTNFβ with the participation of active oxygen redicals (OR).Methods：It was using chemiluminescence(CL) and electron spin resonance(ESR) techniques. Results：1.The lymphocytes(1×106 ml-1)treated with 10～2 000 U/ml rhTNFβ can induce CL.The highest peak value of CL(RLI)was obtained at 100 U/ml rhTNFβ for 18～20 min.The induced OR was mainly OH.2.After the lymphocyte was treated with 15～62 U/ml rhTNFβ for 72 h,the proliferation effect was obviously observed.This effect was in agree with the CL intensity produced earlier.Conclusion：A suitable dose of rhTNFβ can induce OR production of lymphocyte and promote its proliferation.
Key words rhTNFβ Lymphocyte Chemiluminescence Electron spin resonance(ESR)
肿瘤坏死因子β(Tumor Necrosis Factorβ,TNFβ)又称淋巴毒素(Lymphotoxin,LT)是由活化淋巴细胞所产生［1］ ,它具有抗肿瘤、抗病毒、诱导成纤维细胞、B细胞和胸腺细胞的增殖、分化以及调节免疫功能等广泛的生物学效应［2］ 。而淋巴细胞化学发光(Lymphocyte Chemiluminescence,Ly-CL)则为淋巴细胞活化早期事件之一［3］ 。据此，本文采用淋巴细胞化学发光(Ly-CL)和顺磁共振法(Electron Spin Resonance,ESR)研究TNFβ诱导人外周淋巴细胞产生活性氧自由基(Oxygen Radicals,OR)释放水平的动态变化及其与淋巴细胞增殖的相关性，为探讨活性氧参与TNFβ诱导淋巴细胞活化的作用机理提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 外周血淋巴细胞制备 按常规方法进行，细胞存活率＞97％，粒细胞比例＜3％。
1.2 药品和试[1] [2] 下一页
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