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锑对小鼠肝线粒体抗氧化酶系统影响的实验研究 |
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，染锑动物以40 mg/kg体重(以锑计)剂量，每天腹腔注射三氧化二锑乳浊液(三氧化二锑加适量吐温80、鱼肝油及蒸馏水配制而成)1次，每周5次，连续染毒4周。对照组注射等体积的吐温80、鱼肝油及蒸馏水乳剂。
2.样本收集与处理：分别于染毒第7、14、21、28天，分4批以股动脉放血处死动物，留取血样分离血清备检。立即取出肝脏去除被膜和结缔组织，称重。肝线粒体的制备以Robert差速离心法［4］进行。供病理形态检查的标本置10%福尔马林溶液固定，其他样本均置-20℃冰箱中待测。各项指标的测定均于24小时完成。
3.观察指标与测定方法：金属锑含量测定用原子吸收石墨炉法；血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)用赖氏法；肝脏病理形态血检查，光镜下，HE染色；超氧化物歧化酶(SOD)用亚硝酸盐法；谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)用DTNB直接法；丙二醛(MDA)用硫代巴比妥酸(TBA)反应法；测定用试剂盒均由南京建成生物工程研究所生产。
实验数据以SPSS统计软件包处理。
结果与分析
1.锑含量的变化：随染毒时间延长，锑组动物血锑、肝锑含量进行性增加，与对照组相比较，差异有高度显著性(P<0.01)；染毒28天，锑组动物血锑、肝锑含量分别是对照组的29倍和179倍(表1)。
表1 各组动物组织中锑含量的变化(±s)
染毒时间
(天) 血(μg/ml) 肝(μg/ml)
对照组 实验组 对照组 实验组
7 0.018±
0.000 0.667±
0.254* 0.016±
0.005 0.905±
0.121*
14 0.017±
0.013 0.757±
0.408* 0.022±
0.011 1.179±
0.791*
21 0.018±
0.033 0.845±
0.368* 0.025±
0.027 3.814±
2.713*
28 0.019±
0.010 1.045±
0.419* 0.023±
0.009 3.328±
2.200*
t检验，*P<0.01，n=5
2.肝损害指标的变化：由表2可知，染毒组动物血清AST、ALT分别于染毒第14、21天与对照组比较，差异有显著性(P<0.05)，并持续增高至实验结束，与肝脏中锑含量的增加呈显著的正相关关系(r=0.7547，0.7470)；染毒28天，染锑动物出现肝细胞浊肿、空泡形成和局灶性肝细胞坏死等改变。
3.肝线粒体SOD、GSH-Px的变化：如表3所示，
表2 各组动物血清AST、ALT含量的变化(±s)
染毒时间
(天) AST(U/L) ALT(U/L)
对照组 实验组 对照组 实验组
7 120.81±
5.79 131.40±
9.15* 24.82±
4.75 30.04±
3.11
14 127.36±
9.03 140.96±
9.07* 25.73±
5.93 33.92±
5.49
21 129.79±
12.68 167.32±
8.06** 27.81±
8.70 41.89±
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