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单核细胞增生李斯特菌污染调查及快速检验方法的比较 |
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余淑冰1 梁景涛1 周强忠1 孔繁钧1 陈庆韶1 李婉霞2
单核细胞增生李斯特菌(LM)能引起人畜共患病，致病性强，临床病死率高达30%～70%。目前，国际上对其研究非常重视，已将其列为90年代食品四大致病菌(致病性大肠菌、肉毒梭菌、亲水气单胞菌和LM)之一。我国在LM研究及检验起步较晚，经验较少，1994年才颁布该菌的标准检验方法。为了解食品中LM的污染状况，开展应用快速检验方法，作者于1996年5月至1997年4月对佛山地区的市场销售点，抽取6类不同的食品共309份，作为LM污染调查对象，同时根据现有的检验方法，探索出一种快速可行的检验方法，现报告如下：
一、材料与方法
1.样本来源：选取佛山市区5个肉菜市场的各个肉档、鱼档、烧腊档、菜农等6类食品，每类食品50份以上。其中乳和水产品分别由水牛奶厂和水产加工场提供。6类食品具体包括有：①生肉类：猪肉、猪肉馅、鸡肉、牛肉、羊肉。②熟肉制品：猪肉、猪肉肠、鸡肉、牛肉。③乳类：生牛奶、消毒牛奶。④乳制品：冰淇淋、奶酪、酸奶、果奶。⑤蔬菜：黄瓜、香菜(去根)、菠菜(去根)、菜花(指花菜)、莲藕。⑥水产品：鱼、虾。
2.标准菌株：LM(54004和54007)、金黄色葡萄球菌、马红球菌(R.equi)由卫生部食品卫生监督检验所提供。
3.培养基和试剂：本实验室配制，并以有关阳性菌株进行质量控制。
4.试验动物：采用广东省卫生厅医用实验动物所饲养的瑞士小白鼠，选取体重在16～18 g之间作试验用。
5.试剂盒：由生物-梅里埃公司提供，使用时按说明书进行。
6.方法：按国标食品卫生检验方法GB4789.30-94进行。
二、结果
1.6类食品检测情况：在受检的6类食品共309份中，检出阳性菌株16份(已由卫生部食品卫生监督检验所鉴定)，总污染率为5.18%(16/309)，其中在生肉、熟肉制品、生牛奶和水产品中均检出LM。采用LB法检出率为62.5%(10/16)，EB法检出率为37.5%(6/16)，LB法明显高于EB法，见表1。
表1 六类食品LM检出情况
类别 检测
份数 阳性份数 两法检出
EB法 污染率
(%) LB法 污染率
(%) 份数 污染率
(%)
生肉 50 2 5.88
2 5.88
4 8.00
熟肉制品 52 2 8.33 4 16.67 6 11.54
乳 57 2 4.17 0 0 2 3.51
乳制品 50 0 0 0 0 0 0
蔬菜 50 0 0 0 0 0 0
水产品 50 0 0 4 18.18 4 8.00
2.国标法分离鉴定结果：在检出的阳性菌株16份中，其中熟肉制品和生牛奶各2份为LM，其余的冻虾肉、生肉和熟肉制品各4份为英诺克李斯特菌(LI)。
3.API法鉴定结果情况：对检出的阳性菌株16份进行3次试验，结果4份为LM，查手册编码6510，12份为LI，查手册编码7510，见表2。
表2 API法对16株阳性菌检测情况
菌名 DIM ESC αMAN DARL XYL RHA MDG RIB GIP TAG 手册编码
LM(4份) - + + + - + + - - - 6510
LI(12份) + + + + - + + - - - 7510
4.国标法与API法的比较：两法在获得可疑菌落时，国标法作确证试验仍需3～14天，而且部分试验，如cAMP试验、溶血试验、小鼠毒力试验，要做得好难度较大，而API法仅需1天，无需什么设备，易掌握。两法检出的LM 4份均属同样的样品编号，LI 12份也属同样的样品编号，两法相符率100%。
三、讨论
1.样品的代表性与污染分析：此次调查6类食品309份，样品来源较广泛。产地有广州、深圳、中山、佛山等地，基本反映了我省这部分地区食品中LM的污染状况，总污染率为5.18%，主要检出的食品有生肉(8%)、生牛奶(3.51%)、熟肉制品(11.54%)和水产品(8%)，尤其熟肉制品阳性率高达11.54[1] [2] 下一页
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