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邓新国 郭雪 吴景兰 郭希让 庞广仁 田小莉
摘 要：目的 探讨8-Br-cAMP对人视网膜母细胞瘤之HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应及其对细胞生长的影响。 方法 应用原位杂交、RNA斑点印迹技术检测p16INK4 mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、mp53 mRNA和Rb mRNA，应用免疫组织化学和蛋白质斑点印迹技术检测PCNA-IR、p21WAF1-IR、p16-IR、pRb-IR、cdk2-IR和cdk4-IR。 结果 在人HXO-Rb44细胞内p16INK4mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、mp53 mRNA及Rb mRNA位于胞质，p16-IR，p21WAF1-IR及pRb-IR主要位于胞核。在mRNA和蛋白质斑点印迹标本上，p16INK4 mRNA、p21waf1 mRNA、wp53 mRNA、Rb mRNA和p16-IR、p21WAF1-IR及pRb-IR的相对扫描数值均是实验组(经8-Br-cAMP处理)高于各自的对照组(未经8-Br-cAMP处理)，P＜0.05～0.01；然而mp53 mRNA、PCNA-IR、cdk2-IR和cdk4-IR的相对扫描数值均是实验组低于对照组，P＜0.05～0.01。 结论 (1)8-Br-cAMP可抑制HXO-Rb44细胞的生长增殖；(2)8-Br-cAMP可上调抑癌基因的表达，包括p16INK4mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、Rb mRNA及p16、p21WAF1、pRb的蛋白表达；(3)8-Br-cAMP可下调mp53 mRNA、PCNA-IR以及cdk2-IR和cdk4-IR的表达；(4)结果提示8-Br-cAMP可通过阻抑细胞周期进展相关基因的表达而抑制人HXO-Rb44细胞的生长增殖。
关键词：视网膜母细胞瘤细胞；抑癌基因；原位杂交；依赖周期素蛋白激酶
分类号：R739.7+ 2 文献标识码：A
文章编号：0529-1356(2000)01-61
THE EFFECT OF 8-Br-cAMP ON EXPRESSION OF
ANTIONCOGENES IN HUMAN RETINOBLASTOMA
HXO-Rb44 CELLS IN VITRO
DENG Xin-guo
(Henan Institute of Ophthalmology,Zhengzhou 450003,China)
GUO Xue
(Henan Institute of Ophthalmology,Zhengzhou 450003,China)
WU Jing-lan
(Henan Health and Proventive Station,Zhengzhou 450003,China)
GUO Xi-rang
(Henan Institute of Ophthalmology,Zhengzhou 450003,China)
PANG Guang-ren
(Henan Institute of Ophthalmology,Zhengzhou 450003,China)
TIAN Xiao-li
(Henan Institute of Ophthalmology,Zhengzhou 450003,China)
Abstract：Objective To study 8-Br-cAMP effect on cell growth and antioncogene expression in human retinoblastoma HXO-Rb44 cells. Methods The p16INK4mRNA,p21WAF1 mRNA,w(wild type)p53 mRNA,m(mutant type)p53 mRNA and Rb mRNA were detected by in situ hybridization and RNA dot blot technique.The PCNA,p16,p21WAF1,pRb,cdk2 and cdk4 proteins were detected by immunohistochemistry and protein dot blot technique. Results The signals of p21WAF1 mRNA,p16INK4mRNA,w[1] [2] [3] 下一页
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