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庚型肝炎病毒在肝炎及肝癌患者中感染情况 |
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录酶及Taq酶均为Promega公司产品。引物设计参考已发表的HGV序列(GenBanKV44402)，选择NS5区的高保守区段，计算机辅助设计，由赛百盛公司合成，扩增产物为200bp。
HGV RNA提取参照文献［1］的方法，提取后的RNA直接溶于反转录-扩增缓冲液中，加入3μAMV逆转录酶及1U Taq DNA聚合酶，42℃ 30min逆转录成。DNA，94℃ 4min灭活AMV后直接进入第一次PCR扩增，扩增条件为：94℃30s，55℃30s，72℃30s。扩增32个循环后取第一次PCR扩增产物2μl进行第二次PCR扩增，最终PCR产物经2%琼脂糖凝胶电泳分析。
结 果
HGV RNA阳性检出率：乙肝为9%(12/130)、丙肝为10%(3/30)、非甲-戊型肝炎为17%(4/24)。24例肝癌患者术前血清及癌组织、癌周组织为0%(0/24)。
讨 论
庚型肝炎病毒是1995年下半年Simons JN［2］和Lecrry TP［3］两家实验室相继报告的一种新型与人类肝炎相关的RNA病毒基因。美国Lecrry TP［4］等报告，HGV阳性率在慢性肝炎中7.9%，爆发性肝炎中9.1%，非甲-戊型急性肝炎中8.7%，肝细胞癌中3.4%。Linnen J等［5］研究表明，HGV的感染分布较广泛，乙肝中HGV阳性率为9.72%，丙肝阳性率为18.75%，HGV不但与HBV和HCV重叠感染，同时在非甲-戊型肝炎及多次输血者，自身免疫性肝炎及血友病，酒精性肝炎患者血清中也可检出HGV RNA。在我国HGV与HBV、HCV重叠感染及在非甲-戊型肝炎中的感染率各家报告不一。关于HGV与肝癌组织及癌旁组织之间的相关性尚无满意报道。本实验HGV检出率乙肝为9%(12/130)，丙肝为10%(3/30)。非甲-戊型肝炎17%(4/24)；24例原发性肝癌病人术前血清及癌组织、癌旁组织HGV RNA(－)。说明庚型肝炎病毒是普遍存在的一种肝炎病毒常与乙肝、丙肝重叠感染，这可能HGV 与HBV、HCV传播途径相似有关，是非甲-戊型肝炎中病源之一。本实验显示HCV、非甲-戊型肝炎中HGV RNA检出率与上述报告［4～5］有差异，可能与感染人群的选择，地域差别及所取的例数有关。24例原发性肝癌病人HGV感染率为0%，提示HGV与肝细胞癌相关性不大，可能在肝细胞癌中不是重要的致癌因子。本实验也显示原发性肝癌病人中19/24例HBsAg(＋)，2/24例抗HCV(＋)。说明在我国肝癌仍主要与乙肝、丙肝病毒感染有关，其中乙肝更为重要。
1 北京邮电总医院 北京医科大学第八临床医学院 100032
2 北京地坛医院
参 考 文 献
1 Chomezynskip,succhin single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction Anal biochem,1987,162∶156.
2 Simons JN,Lecrry TP,Darrson GJ,et al. Isolution of novel Virms-like sequences associated with human hepatitis. Nuture Medicine, 1995,1∶564.
3 Lecrry TP,Muerhoff AS, Simons JN, et al. Sequence and genomic organization of GBV-C A novel member of the flaviviridne associated with human nonA-E hepatitis. J Ned Virol,1996,48∶60.
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