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丹参提取物F抗大鼠胃窦部粘膜再灌注损伤作用的研究 |
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>材料与方法
一、动物模型及分组：
选用Wistar系雄性健康大鼠，体重260～300 g，实验前禁食24 h，腹腔注射20%乌拉坦(5 mg/100 g.BW)麻醉后气管插管，保持气道通畅，颈动脉插管监测平均动脉压，股动脉插管用于放血及血液回输，开腹洗胃，结扎幽门，尾静脉穿刺，经微量电子输液泵以0.03 mL/min速度输注NS或DSEF，25 min后胃内灌注0.1 mmol/L HCl(1 mL/min.100 g. BW) 5 min后如处死则形成假手术组(SC)；如放血至平均动脉压2.67～4.00 kPa，维持20 min后再处死，则形成单纯失血组(HE)；如将放出的血于大鼠失血性休克20 min后全部回输，再维持20 min后处死，则形成再灌注损伤模型［1］，它包括DSEF组及生理盐水组(NS)，前者尾静脉滴注DSEF(1 g/100 g.BW)(DSEF：由中国医科大学化学检验中心提供)，SC、HE及NS组大鼠滴注NS。
二、观察指标及测定方法：
1.损伤指数：通过大体观察，测定胃窦部粘膜出血性损伤面积及胃窦部面积，二者百分比即为损伤指数［2］。
2.损伤深度：分为0～Ⅲ级，损伤依次加重。
(1)光镜：根据Itoh和Lacy标准行如下分级［3］； 0级：正常胃粘膜；Ⅰ级：表层细胞受损；Ⅱ级：胃小凹细胞受损；Ⅲ级：胃腺细胞受损。
(2)扫描电镜：依Rittar标准行如下分级［4］； 0级：正常胃粘膜；Ⅰ级：表层细胞变形，个别破溃；Ⅱ级：表层细胞缺失，基底膜暴露；Ⅲ级：基底膜受损。依各级损伤占整个切片长度百分比判断损伤程度，光、电镜间分级具有紧密相关（r=0.846, P＜0.01)。
3.细胞内钙含量测定：将粘膜置37℃ La3＋液中10 min，而后放于80℃烤箱内36 h，再消化过夜，加1% LaCl3后用原子吸收法测定钙浓度。
实验结果用平均值±标准差()表示，并行t检验。
实验结果
一、各组大鼠失血量及平均动脉压比较：
如表1所示，各组大鼠平均失血量在19.80～22.30 mL/kg，平均动脉压：失血前13.60～14.99 kPa，失血期3.29～3.67 kPa，再灌注后14.43～16.04 kPa，失血量及平均动脉压组内，组间无显著差异(P＞0.05)，说明再灌注后的休克复苏是成功的，DSEF对失血性休克-再灌注的影响与心血管功能无关。
表1 各组大鼠失血量及平均动脉压比较
Tab 1 Comparison of bleed volume and mean arterial pressure between different groups ()
Group n Bleed volume (mL/kg) Mean arterial pressure (kPa)
Before bleed During bleed After reperfusion
HE 9 21.70±0.80 14.99±0.55 3.67±0.15
NS 10 19.80±1.00 14.37±0.33 3.39±0.09 14.43±0.47
DSEF 12 22.30±1.80 13.61±0.54 3.29±0.07 16.06±0.56
二、DSEF对胃窦部损伤指数的影响：
如图1所示，HE组(n=6)损伤指数为0，DSEF组(n=7)损伤指数明显低于NS组(n=9)，1.62%±0.37% vs 7.96%±0.59%,P＜0.01。
Fig 1 Effect of DSEF on index of lesion in gastric antrum
()*P＜0.01, vs NS
图1 DSEF对胃粘膜窦部损伤指数的影响
三、DSEF对胃窦部粘膜损伤深度的影响：
如表2，NS组Ⅰ级损伤明显低于HE组(P＜0.01)，而中、重度(Ⅱ、Ⅲ级)损伤明显高于HE组(P＜0.05,P＜0.01)；DSEF组 正常胃粘膜及轻度损伤(0级上一页 [1] [2] [3] 下一页
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