|
地塞米松对SUNE |
|
朱振宇 邓诣群 戴克胜 张清秀 马润泉
摘 要 目的:以K562细胞为阴性对照,观察SUNE-1和B95-8两种含EBV-BHRF1基因的肿瘤细胞株在2×10-6 mol/L地塞米松(dexamethasone, DEX)作用18 h后,细胞内EBV-BHRF1基因转录水平的改变。方法:细胞RNA的提取、RNA的点杂交(Dot blot)及反转录PCR(RT-PCR)。结果:上述两种肿瘤细胞在2×10-6 mol/L地塞米松作用18 h等诱导细胞凋亡的条件下,细胞内EBV-BHRF1基因的转录水平(mRNA)明显提高。结论:本结果初步显示EBV-BHRF1基因的转录与宿主细胞抵抗凋亡的关系密切。 主题词 地塞米松;爱泼斯坦-巴尔病毒;基因表达调控,病毒
Dexmethasone affects EBV-BHRF1 transcription levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines
ZHU Zhen-Yu,DENG Yi-Qun, DAI Ke-Sheng, ZHANG Qing-Xiu, MA Jian-Quan Department of Biochemistry, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou (510089)
Abstract AIM: To observe the changes of EBV BHRF1 transcription levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines cells incubated with 2×10-6 mol/L Dexamethasone (DEX) for 18 hours at 37℃ using EBV-BHRF1 negative K562 cell line cell as contrl. METHODS:Extraction and detection RNA by Dot blot combined with RT-PCR. RESULTS:EBV-BHRF1 transcription levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines cells arise significantly after incubated with 2×10-6 mol/L DEX for 18 hours at 37℃. CONCLUSION:EBV-BHRF1 gene s transcription is closely related with suppression of its host cell s apoptosis. MeSH Dexamethasone; Epstein-Barr Virus; Gene expression regulation, virus
细胞凋亡(apoptosis),也称程序性细胞死亡(programmed cell death, PCD),是目前活跃的研究领域之一[1]。EB病毒(epstein-barr virus, EBV)属于单纯疱疹病毒Ⅳ型,与人类的多种疾病密切相关,例如以珠江流域为高发中心的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)、在非洲高发的伯基特淋巴瘤及传染性单核细胞增多症等[2]。有报道认为EBV的BHRF1基因产物与Bcl-2有38%同源性,在细胞内的定位也相似,具有抑制宿主细胞凋亡的作用[3]。本室根据EBV全基因序列设计印物[4],用PCR方法证实了人低分化鼻咽癌(SUNE-1)细胞株,B95-8细胞株中含有EBV-BHRF1全基因片段(592 bp),并证实适当浓度的EBV-BHRF1反义寡核苷酸片段能够诱导无血清培养的低分化鼻咽癌(SUNE-1)细胞株发生凋亡[5]。本研究用前文[6]PCR扩增获得的EBV-BHRF1产物为模板,用[32?P]-dCTP标记合成探针,用点杂交(Dot blot)及RT-PCR方法检测SUNE-1和B95-8这两种肿瘤细胞株在2×10-6mol/L在地塞米松作用18 h,即常规诱导细胞凋亡的因素作用下,宿主细胞中EBV-BHRF1基因转录水平的改变,初步探讨该基因的活动情况与宿主细胞抵抗凋亡的关系。
材料与方法
一、材料: 1.缺口翻译(同位素探针[1] [2] 下一页 上一个医学论文: 内皮素抗体在大鼠肾缺血 再灌注损伤中的作用 下一个医学论文: 低密度脂蛋白对培养的人肾小球系膜细胞的增殖作用及冬虫夏草对其的影响
|
|
|
|
|
|
|