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内皮素抗体在大鼠肾缺血 再灌注损伤中的作用 |
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(Sham,n＝6)。
二、药品与试剂：
ET-Ab(Penisula Lab)；戊巴比妥钠(上海化学试剂采购供应站)；尿素氮，肌酐试剂盒(石家庄试剂厂)；PET放免药盒(解放军总医院东亚免疫技术研究所)；cGMP放免药盒(上海中医药大学)。
三、实验程序：
动物经2%戊巴比妥钠(ip)麻醉后，I-R+ET-Ab组开腹暴露双侧肾动静脉，于夹闭肾动静脉前5 min，尾静脉注射ET-Ab(5 μL/100 g体重，1∶10万单位)，夹闭双侧肾动静脉60 min后恢复灌流，逐层缝合腹膜、腹壁肌肉和皮肤，关闭腹腔；I-R组尾静脉给予等量生理盐水，余操作同I-R+ET-Ab组；Sham组手术操作亦同I-R+ET-Ab组，尾静脉给予等量生理盐水，但不夹闭肾动静脉。再灌注后24 h取腹主动脉血5 mL分别测定血浆内皮素(PET，放免法)，血清尿素氮(SUN，二乙酰-肟法)，血清肌酐(SCr，苦味酸法)及血清丙二醛(MDA，硫代巴比妥酸法)，取血后迅速摘取左侧肾脏，于冰板上切取同一部位肾组织，速冻于低温冰箱内待测cGMP，余固定于福尔马林溶液中待做病理形态学观察。
四、统计处理：
所有数据以均值±标准差()表示，采用组间均值t检验判定差异显著性。
结果
一、ET-Ab对肾缺血-再灌注损伤大鼠SUN和SCr的影响(表1)：
表1 ET-Ab对肾缺血/再灌注损伤大鼠血清尿素氮和肌酐的影响
Tab 1 Effects of ET-Ab on contents of SUN and SCr in
the renal I-R rats(,n=6)
Treatment SUN(mmol/L) SCr(μmol/L)
Sham 7.06±1.49 62.76±10.61
I-R 25.85±3.25** 130.80±31.82**
I-R+ET-Ab 12.88±1.87**＃＃ 85.74±15.03*＃
*P＜0.05，**P＜0.01，vs sham group；
＃P＜0.05，＃＃P＜0.01，vs I-R group
肾缺血-再灌注损伤大鼠SUN和SCr值明显高于Sham组，而I-R+ET-Ab组大鼠SUN和SCr升高幅度明显低于I-R组（P＜0.05，P＜0.01)。
二、ET-Ab对肾缺血-再灌注损伤大鼠cGMP和MDA的影响(表2)：
表2 ET-Ab对肾缺血/再灌注损伤大鼠cGMP
和MDA含量的影响
Tab 2 Effects of ET-Ab on contents of cGMP and MDA
in the renal I-R rats (，n=6)
Treatment cGMP(pmol/mg WW) MDA(μmol/L)
Sham 0.21±0.03 23.86±3.16
I-R 0.10±0.03* 43.38±1.66*
I-R+ET-Ab 0.22±0.05＃ 31.63±2.78*＃
*P＜0.01，vs sham group; ＃P＜0.01，vs I-R group
I-R组大鼠肾组织cGMP明显低于Sham组，I-R+ET-Ab组与Sham组无显著差异，但明显高于I-R组。I-R组大鼠血浆MDA含量明显高于Sham组，而I-R+ET-Ab组MDA升高幅度则明显低于I-R组(P＜0.01)。
三、ET-Ab对肾缺血-再灌注损伤大鼠PET的影响(图1)：
Fig 1 Effects of ET-Ab on level of PET in renal I-R in rats (，n=6)
*P＜0.01， vs Sham; ＃P＜0.01， vs I-R
图1 ET-Ab对肾缺血-再灌注损伤大鼠血浆ET水平的影响
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