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人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究 |
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CC温石棉B。
2. 细胞：豚鼠肺泡巨噬细胞(AM)经支气管肺泡灌洗法获得。
3. 超氧阴离子自由基(O-2)的测定［1］：取2×106个AM，分别加入200 μg/ml的温石棉或JFM纤维，在37℃作用2小时后，用细胞色素C还原法测定还原型细胞色素C的生成量来代表O-2的产生量。
4. 过氧化氢(H2O2)的测定［2］：取2×106个AM，分别加入200 μg/ml的温石棉或JFM纤维，在37℃作用2小时后，用酚红氧化法测定H2O2的产生量。
5. 谷胱甘肽(GSH)含量的测定［3］：取2×106个AM，分别加入200 μg/ml的温石棉或JFM纤维，在37℃作用2小时后，超声破碎细胞，用荧光法测定GSH的含量。
6. 细胞内游离Ca2+浓度的测定［4］：取1×106个AM，用Fluo-3/AM负载后，分别加入200 μg/ml的温石棉或JFM纤维，在37℃作用1小时后，用荧光分光光度计测定荧光强度。
7. 统计分析方法：用Primer软件对数据进行t检验。
结果
JFM纤维对AM产生O-2、H2O2、GSH和游离Ca2+含量的影响见表2。
讨论
在矿物纤维的致病机理中，活性氧被认为起了很重要的作用［5］。本研究结果表明，温石棉使AM产生的O-2和H2O2量均明显增多，而在10种JFM纤维中，除WO1外，其他均可使O-2的产生明显增多，但其中只有GW1、SC1、RW1、TO1、WO1和MG1产生的H2O2明显增多，其他4种JFM纤维则与对照的差异无显著性，提示不同的JFM纤维刺激AM产生活性氧的能力不同。与温石棉相比，在刺激O-2产生的过程中，10种JFM纤维均明显低于温石棉；而在刺激H2O2的产生过程中，只有GW1的作用与温石棉相似，其他JFM纤维产生活性氧的能力则均低于温石棉。有研究表明,陶瓷纤维(RCF1～4)、玻璃棉(MMVF10和11)、岩棉(MMVF21)和矿渣棉(MMVF22)均能使活性氧的产生增多［6］。岩棉(MMVF21)和玻璃纤维(CODE100/475)、陶瓷纤维(碳化硅和RCF1)可使AM产生少量的O-2［7］。结合本结果，可以认为大多数MMMF均可刺激活性氧的产生，除个别纤维外，其刺激程度均低于石棉。虽然MMMF通过活性氧致病的作用低于石棉，但仍存在不同程度的毒性作用，值得引起注意。
玻璃棉(MMVF10)和陶瓷纤维(RCF1)均可使AM中的GSH含量下降，但其程度均低于铁石棉[8]。本结果也表明，温石棉与PT1、TO1、SC1、WO1、MG1和RF2均可明显降低AM中的GSH含量。其中PT1和TO1的作用与温石棉相似，提示这些MMMF的确可使细胞产生氧化应激。
表1 实验所用矿物纤维的名称及长度与直径(μm)
样品名 中文名称 英文名称 长度 直径
GW1 玻璃棉 glass wool 20.2±2.58
0.88±3.10
RW1 岩棉 rock wool 16.5±2.51 1.80±2.32
MG1 微细玻璃纤维 micro glass fiber 3.0±2.22 0.24±2.35
RF1 耐火纤维(陶瓷纤维) refractory fibers (ceramic fiber) 12.0±2.36 0.77±2.53
RF2 耐火纤维(陶瓷纤维) refractory fibers (ceramic fiber) 11.0±1.96 1.10±2.00
RF3 耐火纤维(富铝红柱石) refractory fibers (mullite fiber) 11.0±1.75 2.40±1.37
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