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自发性高血压大鼠高血压形成前后肾内小动脉的重建 |
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hypertension in SHR, the remodeling of the renal arterioles is occurred, in which the renal arterioles less than 50μm outer diameter is perhaps due to the rearrangement of medial VSMC, but the renal arterioles more than 50μm outer diameter is due to proliferation of the medial VSMC and increase of the extracellular matrix.
【Key words】 Arterioles; Renal; Remodeling; Spontaneously hypertensive rats(SHR)
动脉中膜平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)的增生、肥大或重排，以及细胞外基质的增加是高血压动脉重建(remodeling)的主要原因，也是高血压动脉重建的重要方式［1］。由于不同类型的高血压以及同一类型高血压不同部位的动脉，其重建方式都不尽相同，所以动脉的重建方式是高血压研究的重要内容之一。肾动脉重建与高血压的发生和发展有着密切的联系，但在高血压形成之前，肾动脉是否已发生重建，尚存在不同的观点［2,3］，在高血压形成后肾动脉重建的方式也不十分清楚。本研究以未形成和已形成高血压的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)为模型，在光镜下研究了肾内小动脉的几何形态学；透射电镜下观测了高血压形成前后肾内小动脉中膜平滑肌细胞和细胞外间隙的横截面宽度的变化，探讨肾动脉形态学重建与SHR高血压发生的关系。
材料和方法
1.材料
雄性SHR分为4、16周2组，每组4只，以同种同龄的正常血压Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作对照(动物由上海市高血压研究所提供)。
2.方法
2.1 肾内小动脉几何形态学研究：大鼠经腹腔注射氯胺酮20mg/kg和安定20mg/kg复合麻醉，左颈总动脉插管测大鼠颈动脉收缩压。放血处死大鼠，迅速取出左肾，保留肾静脉、肾动脉及与其相连的一段腹主动脉。结扎腹主动脉远侧端，将其近侧端连接非循环式Langendroff离体灌流装置(恒压、恒温37.5℃)，以氧合Kreb液在12kPa(90mmHg)压力下灌注左肾，使肾血管处于最大舒张状态，再以多聚甲醛-戊二醛灌注固定。常规脱水、石膜包埋、切片(厚3μm)。切片经酸性茜素蓝染至血管平滑肌呈紫红色。选择圆形或近圆形的动脉，用CA6300计算机图像分析系统(中国科学院自动化研究所)测量动脉的内径、外径、壁厚和动脉壁面积，计算壁厚与内径之比。
2.2 肾内小动脉中膜的形态计量学观测：作肾脏振荡切片，片厚200μm，经0.1mol/L PBS漂洗过夜，锇酸后固定，树脂包埋。在相差显微镜下，选截面呈圆形，外径在100～200μm之间的小动脉，进一步定位，修块，作超薄切片，Hitachi H-800型透射电镜(TEM)摄片。用计算机图像分析系统生成10×10网格，使网格纵线与电镜底片上VSMC或细胞间隙的长轴平行，测量有细胞核处VSMC及其间隙在各网格横线上的截距，以截距的平均值代表宽度(图1)。每组取3只大鼠，每只大鼠取1或2片切片，再各取1或2根小动脉，电镜下每根动脉测量4个不同部位，每一部位测3或4张底片。
图1 VSMC及其间隙的测量示意图
Fig.1 Schematic diagram of vascular smooth muscle cell
and the intercellular space
2.3 结果的统计学处理：两组之间比较用t检验，析因分析用方差分析。
结 果
1. 血压、心率、体重和肾重量
4周SHR颈动脉收缩压有轻微升高，但尚未形成高血压。16周SHR血压、心率都显著高于同龄WKY(P<0.05)，而体重显著小于同龄WKY(P<0.05)(表1)。
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