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建立阿尔茨海默症的转基因动物模型 |
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常洋 秦川 尹红星 朱华 蔡有余
【摘要】 目的 建立阿尔茨海默症转基因动物模型，为病因研究和药物筛选提供了一个合适的动物模型。 方法 通过显微注射方法将外源DNA注射到小鼠受精卵的雄性原核，移植到假孕母鼠的输卵管。仔鼠出生后，经PCR及PCR-Southern杂交检测阳性小鼠。 结果 共注射887枚受精卵，存活482枚，移卵后产仔35只，阳性3只。阳性鼠分别传代，在F2代获得纯合子后建系。免疫组织化学显示在大脑皮层、小脑及海马的神经细胞有Aβ沉淀形成。 结论 通过显微注射的方法已建立与人类发病机理相似的阿尔茨海默症转基因动物模型。
【关键词】 阿尔茨海默症；APP；转基因；模型
【中图分类号】 Q75 【文献标识码】 A
【文章编号】 0529-1356(2000)02-144
ESTABLISHMENT OF THE TRANSGENIC MODEL OF
ALZHEIMER DISEASE
CHANG Yang, QIN Chuan, YIN Hong-xing, ZHU Hua, CAI you-yu
(Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Sciences,
Beijing 100021,China)
【Abstract】 Objective To establish a transgenic model of Alzheimer disease. Methods We constructed the transgene containing the human APP cDNA 695 V717I driven by PDGF promoter which expresses specifically in nervous system. The transgene was microinjected into the male pronucleus of the zygotes. The tail DNA of pups was tested by PCR and Southern blot. Results 887 embryos were microinjected, 482 were implanted to 20 recipient pseudopregnant mice, 3 of 35 pups carrying the transgene. Each Heterozygous founders generated a transgenic line that was homozygous for the transgene. Immunocytochemistry revealed plaques in pallium, cerebellum, and hippocampus. Conclusions Resembling animal model of the human pathogenic mechanism for the screening of proper remedies established in our laboratory and could be used for further studied.
【Key words】 Alzheimer disease; APP; Transgene; Model
阿尔茨海默症(Alzheimer disease,AD)是进行性神经降解性疾病，通常表现为记忆丧失。其基本病理表现是由于APP在脑部的异常代谢产生的38～42个氨基酸的有神经毒性的多肽(Aβ,β／A4)沉积在大脑皮层和海马结构，形成β-淀粉样斑块［1］。动物模型的缺少已经成为AD发病机理研究及药物筛选的主要障碍。虽然化学方法，免疫方法甚至将多肽直接注入啮齿类动物脑内的努力都已尝试，但都不是很理想［2］。1980年Cordon等［3，4］以玻璃针刺进受精卵的雄原核，注入DNA溶液，成功地获得转基因动物。利用转基因技术复制人类疾病动物模型，已成为一个主要发展方向。
我们以PDGF启动子调控APP cDNA构建转基因，通过显微注射进入小鼠受精卵的雄性原核。通过PCR及Southern杂交检测获得阳性小鼠，现在正在传代建系。
材料和方法
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