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我国沿海五省市致病性弧菌的分布调查及病原学研究 |
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1.标本来源：1995年9～11月自山东、上海、浙江、广东和海南5省市10个地区采集样本51份，其中水源水29份，包括江水、河水、塘水和海水；饮用水11份；食品11份，有海鱼、鱼塘鱼、螺等。
2.培养基：碱性蛋白胨水，GN增菌液，SF增菌液，TCBS琼脂，麦康凯(Mcc)琼脂，SS琼脂，营养琼脂，各种生化反应培养基及SWF-A微量生化鉴菌板。以上培养基为中国腹泻病控制上海试剂供应研究中心、卫生部上海生物制品研究所和上海市医学化验所试剂厂产品。
3.诊断血清：霍乱弧菌O1群多价诊断血清、O139群诊断血清由中国腹泻病控制中心上海试剂供应研究中心提供，志贺氏菌属诊断血清由卫生部上海生物制品研究所提供，沙门氏菌属诊断血清为卫生部兰州生物制品研究所产品。
4.仪器：VITEK微生物分析仪，鉴定卡(GNI)。
二、方法：
1.水样采集：参照文献［4］进行。
2.细菌分离：取水样225ml，加入10×碱性蛋白胨水25ml中，经35℃增菌6～8小时，挑取表面培养物接种于TCBS平板和Mcc平板，置35℃培养18～24小时，自TCBS平板挑取黄色和蓝绿色菌落接种于营养琼脂平板，35℃培养18～24小时，进行致病性弧菌鉴定。Mcc平板上的可疑菌落做气单胞菌属和邻单胞菌属细菌的鉴定。
取食品1cm×1cm×0.3cm，于无菌研钵中研碎，置碱胨水中增菌。以下步骤同上。
沙门氏菌属和志贺氏菌属的分离，是将水样分别置于10×SF增菌液及10×GN增菌液中，经35℃18～24小时和6～8小时增菌后，接种SS平板，按常规程序进行鉴定。
3.生化鉴定：对氧化酶阳性、具有动力、分解葡萄糖的菌株，用SWF-A微量生化鉴菌板进一步做系统生化反应，并加做必要的补充试验。参照文献［5］的方法进行菌属和菌种的鉴定。应注意麦氏弧菌氧化酶为阴性。
4.血清学鉴定：对疑似霍乱弧菌的菌落进行O1群和O139群凝集试验。
结 果
1.致病性弧菌的分布情况：采集的51份标本有34份分离到致病性弧菌(66.7%)。29份水源水中27份检出致病性弧菌，检出率为93.1%，饮用水和食品各11份，检出率分别为9.1%和54.5%。
外环境水源水中共检出38株致病性弧菌，分布情况见表1。38株菌主要分布于沿海的江水(31.5%)和河水(26.3%)中，塘水和海水次之，均为21.1%。11份饮用水中检出1株亲水气单胞菌。食品中分离到5株气单胞菌属细菌和1株河弧菌。
表1 外环境水中致病性弧菌分布情况
菌 属 检出
株数
江水
(7份) 河水
(8份) 塘水
(7份) 海水
(7份)
弧 菌 属 24 6(25.0) 7(29.2) 4(16.6) 7(29.2)
气单胞菌属 12 5(41.7) 3(25.0) 3(25.0) 1(18.3)
邻单胞菌属 2 1(50.0) 0(0.0) 1(50.0) 0(0.0)
合 计 38 12(31.5) 10(26.3) 8(21.1) 8(21.1)
注：表中括号内数字为百分率
致病性弧菌的地域分布：东海、南海和黄海分别采集标本35、13和3份，致病性弧菌检出率前两者均为77%，后者为67%，表明我国沿海不同地域致病性弧菌分布相近。黄海取样数较少，有待于进一步调查。
2.致病性弧菌分离鉴定结果：51份标本经细菌学检查分离出致病性弧菌45株，其中弧菌属细菌25株(55.6%)，气单胞菌属18株(40.0%)，邻单胞菌属2株(4.4%)，结果见表2。此次调查共检出弧菌科3个菌属9种细菌，豚鼠气单胞菌占首位(26.7%)，其次为溶藻弧菌(22.2%)和副溶血弧菌(11.1%)。
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