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神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探 |
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辛宏 颜光涛 郝秀华 王录焕 李英丽
摘 要 目的：观察神经酰胺对HL-60及中性粒细胞(PMN)凋亡产生的影响,探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法：采用DNA凝胶电泳,流式细胞术,光镜及RT-PCR等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因bcl-2, c-myc mRNA表达分析。结果：神经酰胺(C2 -ceramide), 肿瘤坏死因子(TNFα)及长春新碱(Vincristine)均可不同程度地诱导HL-60及成熟PMN产生凋亡, CPK激活剂PMA, Diacylglycerol无诱凋作用, 并对TNFα,C2-ceramide及Vincristine诱导的凋亡有不同程度的抑制；上述药物刺激后bcl-2, c-myc mRNA表达在HL-60细胞中呈明显下调趋势, c-myc mRNA表达在PMN中也呈轻度下调。结论： 神经酰胺可作为HL-60、PMN胞内介质参与凋亡信号的传导，且与CPK途径及bcl-2，c-myc基因表达相关。
关键词 细胞凋亡 神经酰胺 bcl-2基因 c-myc基因
中国图书分类号 R392.12
Induction of apoptosis by ceramide in human promyelocytic cells and its mechanism
XIN Hong, YAN Guang-Tao, HAO Xiu-Hua et al.
Laboratory of Biochemistry, Basic Medical Center, General Hospital of PLA, Beijing 100853
Abstract Objective： To determine the effects of ceramide on apoptosis and regulation in granulocytes differentiation processes. Methods： DNA fragmentation, FACS , light microscope and RT-PCR were employed to determine the apoptosis and bcl-2,c-myc mRNA levels of granulocytes. Results： C2-ceramide, TNFα and Vincristine all resulted in a time and dose-dependent apoptosis of PMN and HL-60 cells.They also induced down-regulation of bcl-2,c-myc mRNA expressions in HL-60 cells and a light down-regulation of c-myc mRNA expression in PMN. A proper dose of phorbol ester (PMA) and diacylglycerol could not induce cell growth suppression but inhibite apoptosis induced by the drugs above. Conclusion： Ceramide was a mediator of apoptosis in PMN and HL-60 cell. The transduction of apoptotic signal was correlated with the CPK pathway,the down-regulation of bcl-2 and c-myc mRNA expression.
Key words Apoptosis Ceramide bcl-2 c-myc gene
细胞凋亡(Apoptosis)是细胞生理性死亡过程,在维持机体内环境稳定,减少自身免疫及炎症反应中有重要作用。中性粒细胞(PMN)是炎症反应的重要标志, 在炎症的发生、发展和转归中起至关重要的作用。PMN的清除机制仍未明确,但近年来认为通过凋亡方式在膜完整状态下被巨噬细胞识别和清除［1］,是维持机体正常数量PMN,进而限制细胞损伤,促进炎症吸收的重要机制。
神经酰胺,即N-脂酰鞘氨醇(Ceramide)是神经鞘磷脂(SM)主要的水解产物, 作为一个新的第二信使[1] [2] [3] 下一页
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