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可溶性HLA |
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及ELISA四种[1]。细胞毒抑制试验操作简便,但只能定性不能定量,也容易受抗体额外反应干扰。ID-IEF可检测sHLA-Ⅰ的同种异型,但也不能定量。FACS要求设备及试剂用量大。双抗夹心法ELISA检测sHLA-Ⅰ技术至今未引进国内,本法包被抗体为W6/32 mAb,它识别sHLA-Ⅰ分子α链的3区,该区无多态性[2]。W6/32 mAb的质量很重要,笔者曾比较未纯化或去除Fc片段的W6/32 mAb,灵敏度很低。本技术固定包被条件,达到检测上限(125.00 ng/ml)时,OD值为1.500左右,调整抗β2m-HRP浓度及稀释被检血清,确保检出范围6.20~125.00 ng/ml时,OD值与sHLA-Ⅰ含量的对数成正比。标本中血红蛋白、免疫球蛋白、BSA及W6/32 mAb均不产生假阳性,灵敏度、重复性均较理想。竞争抑制试验表明抗β2mmAb能特异性结合sHLA-Ⅰ的β2m。
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