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供者抗原经门静脉输注诱导特异性免疫耐受的研究 |
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王佳 卢一平 杨宇如 唐孝达②
摘 要 目的：探讨供者特异性抗原在诱导免疫耐受中的作用和地位。方法：采用大鼠异位(颈部)心脏移植模型，通过门静脉途径输注不同类型供者特异性抗原。结果：发现供者特异性输血(DST)、供者特异性脾细胞(DSSL)和供者特异性骨髓细胞(DSBM)能诱导受体对供体移植物产生免疫耐受。结论：这类免疫耐受的产生可能与肝脏特殊免疫功能有关；Kupffer细胞可能在其中起重要作用。但门静脉耐受对外周血CD8+细胞的影响不明显。
关键词 输血 脾细胞 骨髓细胞 门静脉 免疫耐受
中国图书分类号 R69
Study of the donor-specific antigens induce tolerance by portal vein in fusion
WANG Jia, LU Yi-Ping, YANG Yu-Ru et al.
The First Hospital of West China Medical University, Chengdu 610041
Abstract Objective:To find whether the donor specific antigens can induce immunological tolerance. Methods:A rat model of cervical heterotopic cardiac transplantation was established and the different donor antigens were infused through the portal vein. Results:DST,DSSL and DSBM can induce the specific tolerance by the way of portal vein infusion. Conclusion:The immunological tolerance correlated with the special immunological function of the liver. Kupffer s cells may play an important role in inducing allograft tolerance.
Key words Whole blood Splenocyte Bone marrow Portal vein Tolerance
肝脏和门静脉独特的解剖学位置和结构决定了肝脏具有特殊的免疫功能。近年来，门静脉耐受的研究主要集中在器官移植的运用方面，但关于门静脉耐受的机制仍然不清楚。本文将重点探讨肝脏作为特殊免疫器官在耐受诱导的形成和维持中所发挥的作用和可能机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 健康纯系雄性大鼠，供体Wistar，受体SD(华西医科大学实验动物中心，持一级动物生产许可证)，体重200～250 g。
1.1.2 实验材料 CsA(Sandoz，瑞士)，口服水剂；RPMI 1640(Gibco，美国)，Ficoll(pH 7.2，上海试剂二厂)；丝裂霉素C 50 mg/ml(Kyoima Hakko CO.Lt，日本)；3H-TDR1 mCi/ml(上海原子能研究所)；单克隆抗体CD8+(羊抗鼠Sigma，美国)。
1.2 方法
1.2.1 心脏移植模型 采用颈部异位移植，即供心无名动脉和肺主动脉分别与受体右颈内动脉和右颈外静脉行端端吻合。通过触诊和移植心心电图记录移植物存活和排斥反应发生时间。
1.2.2 刺激抗原的制备
1.2.2.1 全血的制备 无菌取血，各供体开腹经腔静脉采血2 ml，肝素化备用。同时回输生理盐水5 ml。
1.2.2.2 脾细胞悬液制备 无菌取脾。60目不锈钢网碾磨过滤，离心悬液(1 000 r/min)，加红细胞溶解液，Hank s液清洗2次。RPMI 1640调整细胞浓度为1×108 ml-1。台盼蓝拒染法判断细胞活性大于90%。
1.2.2.3 骨髓细胞悬液制备 无菌切取供体髂骨和股骨，Hank s平衡液冲洗骨髓腔，离心(1 000 r/min)，调整细胞浓度为1×108 ml-1。
1.2.2.4 外周血淋巴细胞分离 鼠尾静脉采血1 [1] [2] 下一页
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