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急性心肌梗塞患者外周血活性T淋巴细胞亚群的研究 |
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ms, San Jose)
三、淋巴细胞荧光抗体标记：
新鲜的全血30 μL与抗体10 μL混合，室温孵育30 min。红细胞裂解液(0.155 mol/L NH4Cl,0.01 mol/L KHCO3，0.1 mol/L EDTA, pH 7.4)裂解红细胞，离心获取有核细胞，用PBS洗涤两次后，加入anti-IgG．FITC(异硫氰酸荧光素)10 μL，室温孵育30 min, PBS洗涤。第二次荧光标记方法同上，第二次标记荧光单抗为anti-IgG．PE。PBS洗涤后用1%多聚甲醛固定10 min后，用流式细胞仪分析。
四、流式细胞仪数据获取和分析：
全部数据用流式细胞仪(FAC StarPlus，美国BD公司)和软件LYSYS Ⅱ进行双色荧光参数获取和分析，简述如下：在前散射(FSC)和侧散射(SSC)的二维Dot-plot图中，划出淋巴细胞区，然后对淋巴细胞作FITC和PE的荧光强度检测，荧光Ⅰ(FL1)为FITC，滤过片为(530±10) nm带通，荧光Ⅱ(FL2)为PE，滤光片为(575±10) nm带通。数据分析时，在确定每次检测阳性细胞百分率之前，根据isotype的非特异性荧光强度设定界限，以确定双阴性、双阳性和单阳性区。
五、统计学处理：
实验数据以表示，用GB-Stat数据统计软件分析实验数据，两组均数比较使用Student t检验。
结果
(一)AMI患者外周血T细胞亚群和HLA-DR(简称DR)表达水平的变化：由表1可看出，AMI患者外周血无明显改变，显著低于对照组(P＜0.05)，和DR显著高于对照组(P＜0.01)，/比值明显低于对照组(P＜0.01)。表明AMI患者细胞免疫功能可能受到抑制。
表1 急性心肌梗塞患者外周血T细胞亚群和HLA-DR表达水平的改变
Tab 1 Changes in peripheral blood T-cell subsets and expressions of
HLA-DR on T-cell in acute myocardial infarction (AMI)()
n ％ ％ ％ DR＋％ ／
Control 12 62.8±12.0 40.8±9.4 23.9±10.7 17.8±9.6 1.7±0.6
AMI 15 68.4±8.0 29.1±13.2* 46.6±19.4** 36.2±12.7** 0.7±0.3**
*P＜0.05,**P＜0.01,vs control
(二)AMI患者细胞免疫功能状态的改变：见表2结果，DR＋和DR＋显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01)，DR＋未见明显改变，DR＋／DR+显著高于对照组(P＜0.01)。说明AMI患者活性T淋巴细胞平衡失调。
表2 急性心肌梗塞患者细胞免疫状态的变化
Tab 2 Changes of immune status in patients with AMI()
n DR＋(％) DR＋(％) DR＋(％) DR＋／DR＋
Control 12 8.6±7.7 2.0±1.8 7.0±5.4 0.3±0.3
AMI 15 21.3±9.2** 14.4±8.5** 7.2±4.2 2.0±0.8**
*P＜0.05,**P＜0.01, vs control
(三)活性T淋巴细胞占总T淋巴细胞或其相关亚群比例的改变：见表3，DR＋和DR＋在总T淋巴细胞中所占比例均高于对照组(P＜0.05或P＜0.01)，DR＋占比例也高于对照组(P＜0.01)，DR＋在和中所占比例与正常对照组无显著差异。
表3 AMI患者活性淋巴细胞占T淋巴细胞或其相关亚群百分率的变化
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