|
裸粒水稻同源四倍体的人工诱导 |
| |
上生根。
1．5 再生植株倍性的初步鉴定
再生植株试管苗成苗期进行倍性鉴定，采用测定气孔保卫细胞的大小结合染色体数目检验法〔9〕。
1．6 统计方法
绿苗率=[（分化绿苗的愈伤组织块数）/（处理愈伤组织块数）]×100％
四倍体比率=[（四倍体植株丛数）/（再生植株的丛数）]×100％
加倍效率=[（四倍体植株丛数）/（处理愈伤组织块数）]×100％
2 结果与讨论
2．1 裸粒水稻诱导培养基的筛选结果
不同激素配比的培养基对裸粒水稻愈伤组织的诱导效果是不同的（表1），2,4－D的浓度不变（2．0mg/L），激动素的浓度递增时，愈伤组织的诱导率都比较高，分别为53．3％、30．0％和35．0％，而当激动素的浓度一定（1．0mg/L），2,4－D的浓度降低为1．5（mg/L）时，诱导率下降幅度很大，由53．3％降低为14．0％，说明2,4－D是决定愈伤组织诱导率的主要因素，适当浓度的激动素不仅有利于愈伤组织的诱导，而且使外植体产生白色、致密、较硬的胚性愈伤组织。这些结果与籼稻中所报道的诱导情况基本一致〔10,11〕，说明裸粒水稻中的裸基因并未对诱导结果产生明显的影响。总的筛选结果表明，当培养基中2,4－D浓度为2．0（mg/L）、激动素为1．0（mg/L）时诱导率最高，达53．3％。
表1 不同激素配比培养基的诱导效果
编号 2,4-D(mg/L) 激动素(mg/L) 接种胚数 出愈胚数 诱导率(%)
1 1.5 1.0 50 7 14.0
2 2.0 1.0 15 8 53.3
3 2.0 1.5 20 6 30.0
4 2.0 2.0 20 7 35.0
2．2 秋水仙碱处理愈伤组织的加倍效果
目前，已有利用秋水仙碱诱导水稻愈伤组织，获得同源四倍体水稻的报道〔12,13〕，但未发现裸粒水稻同源四倍体方面的研究。我们用秋水仙碱处理裸粒水稻成熟胚诱导的愈伤组织后（表2），发现不同浓度的秋水仙碱处理愈伤组织后均能分化出绿苗并产生加倍植株，但绿苗率与加倍效率不同。200mg/kg和1000mg/kg浓度处理的绿苗率（21．7％、31．7％）比对照（42．9％）明显降低，500mg/kg和800mg/kg的绿苗率与对照相近。加倍效率除200mg/kg浓度较低，为5．0％，其他3种浓度处理的加倍效率都较高，分别为23．3％、30．0％和21．7％，其中以800mg/kg的浓度最好，绿苗率（46．7％）与加倍效率（30．0％）都较其它浓度高。说明在离体培养过程中加适当浓度的秋水仙碱，可得到较多的再生植株及裸粒水稻的四倍体无性系：处理浓度选择在500～1000mg/kg范围内效果较好。
表2 不同浓度的秋水仙碱处理后的加倍效果
秋水仙碱浓度(mg/kg) 处理愈伤组织(块) 再生绿苗数 绿苗率(%) 四倍体植株数 四倍体比率(%) 加倍效率(%)
200 60 13 21.7 3 23.0 5
500 60 23 38.3 14 60.9 23.3
800 60 28 46.7 18 64.3 30.0
1000 60 19 31.7 13 68.4 21.7
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 甘蓝型油菜长角果变异体的遗传研究
下一个医学论文： 抗菌肽D基因导入番茄及转基因植株的鉴定
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文