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大鼠肝内起始淋巴管超微结构观察 |
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淋巴生成途径的基础。
材料和方法
Wistar大鼠10只,雌雄不限,重200~300g。乙醚麻醉,常规手术开腹。每只动物随机取肝组织10块,立即入2.5%戊二醛内固定。按常规618树脂包埋。制半薄切片,光镜下观察,选出门管区有淋巴管的,再定位修块,作超薄切片,厚50~70nm,在透射电镜(日本产,H600)下观察。根据肝内起始淋巴管特征[4],确认起始淋巴管后摄片。任意抽取200张照片,经计算机图像分析系统(MagisvanⅡ, A Joyve Loebl公司,英国)测定内皮细胞中小泡的分布情况,数密度,体密度和内皮细胞连接的类型,开放率及特殊连接(桥粒,中间连接,紧密连接)装置等各项数据资料。
结 果
1.起始淋巴管的超微结构特征 肝起始淋巴管的腔较大,很不规则,由连续的单层内皮细胞围成,一般为2~3个,少见1个或4个以上内皮细胞围成的起始淋巴管。内皮细胞除核周区以外,其余部分的胞质都很薄,最小厚度平均为82nm。内皮细胞为连续型,无窗孔。内皮细胞外无基膜或有很少量断续的基膜,偶见于内皮细胞连接处。无周细胞。在内皮细胞与周围的胶原纤维之间有成簇存在的锚丝相连。内皮细胞核及其周围的胞质常向管腔内突出,当管腔塌陷时,核多呈扇贝状;而当管腔充盈扩张时,核多呈椭圆形。上述特征与毛细血管截然不同(图1,2)。 肝起始淋巴管内皮细胞中的细胞器较多并密集。大量的线粒体除分布在核周区较厚的胞质中外,即使在胞质很薄的边缘区也随处可见。胞质中有较其他器官淋巴管更为丰富的溶酶体,包括初级溶酶体和次级溶酶体(图3,4)。在核周区有中心粒,高尔基复合体和微管等。在整个胞浆内均可见到散在的核糖体和大量质膜小泡。 2.质膜小泡的形态和分布 肝起始淋巴管内皮细胞中有丰富的质膜小泡(图5),多为圆形或椭圆形,大小不等,但以大的为多,其平均直径为90.6±3.2个/μm3。有时可见小泡融合形成的大泡,最大直径可达267nm。大多数小泡的壁都很薄称为无衣小泡,少数小泡的壁较厚,为有衣小泡。用计算机图像分析系统测量了40个起始淋巴管内皮细胞中的1 064个小泡,其数密度为39.8±3.0个/nm,体密度为0.028±0.002。小泡的分布形式有3种:多数小泡游离于细胞质内,占72.8%;少数贴近管腔面,包括已开口于管腔的,占18.1%;还有一些贴近外侧面细胞膜,包括向管腔外开口的,占9.1%。分布在核周区的小泡占41.4%,分布在胞质较薄处的小泡占53.3%,而在内皮细胞连接处的小泡则很少,仅占5.3%。 3.内皮细胞连接 肝起始淋巴管内皮细胞的连接形式与其他器官内的相同,也有3种类型,即端端连接、重叠连接和嵌插连接。我们观察150个内皮细胞连接点,以重叠连接为最多,占46.0%(69个),其次为嵌插连接,占34.0%(51个),端端连接最少,占18.7%(28个)。此外还见到两个开放连接,占1.3%。连接间隙的宽度分别为300nm和33nm(图6)。在重叠连接和嵌插连接中,常可见到相互重叠或交错的内皮细胞突起之间形成间隙(图7),平均宽度为247.5nm,最宽的可达600nm。在各种连接类型中有特殊连接装置的占60.7%,其中以桥粒最多见(图8),大多见于嵌插连接处,少数见于重叠连接。
讨 论
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