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聚合酶链式反应快速检测E型肉毒神经毒素基因 |
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【 Subject words 】 Botulinal neurotoxin E Gene Polymerase chai
n reaction
E型肉毒中毒是人类肉毒中毒的主要型别之一，在我国其发生频率比A、B型要低的多，
主要分布在东北、华中及西藏等地区。以前认为E型肉毒中毒由E型肉毒梭菌产生的神经毒素
所引起，后来发现某些酪酸梭菌也可产生E 型肉毒毒素，导致婴儿肉毒中毒〔1〕。我们最近
首次报道了一起由E型神经毒素原性酪酸梭菌引起的食源性肉毒中毒〔2，3〕，因此我们对多
次发生过此类肉毒中毒的地区进行了毒素原性酪酸梭菌土壤分布情况的初步调查〔4〕。
利用聚合酶链反应(PCR)特异地扩增肉毒神经毒素基因的某一片段，可达到鉴定和定型肉毒
梭菌的目的，用于食品中肉毒梭菌的检测及其土壤分布调查具有较高的灵敏度和特异
性〔５，６〕。我们已报道了A、B型肉毒神经毒素基因的PCR检测方法〔７，８〕，本实验
利用E型肉毒神经毒素基因特异的寡核苷酸引物扩增其重链区一段DNA片段对本室保藏菌
株及33份土壤标本进行了检查，探讨了PCR用于神经毒素原性梭菌鉴定及其生态分布调查
的可行性。
材料与方法
1.菌种及其培养：选用梭状芽胞杆菌属10种共40株菌进行PCR试验(表1)。所有菌株均保
藏于本实验室，其中大部分菌株由本实验室分离，少数菌株自国外引进。细菌培养及模板DN
A提取均参照前文〔７〕。
表1 本试验所用菌株
Table 1. Species and strains used in this test
Species Type of neurotoxin Strains
C.botulinum A CMCC64201,CMCC64205,LCL096,LCL110,LCL154
B CMCC64301，CMCC64304，LCL123，KZ567
C CMCC64402，CMCC64421，KZ1577
D CMCC64451，LCL111
E CMCC64501，CMCC64502，CMCC64521，LCL062，LCL109。KZ582
F CMCC64551，KZ64，KZ109
G CDC714，CDC1354
C.butyricum E LCL063，LCL095，LCL155，KZ147
C.barattii F KZ146
C.tetani Tetanus CMCC64041
C.butyricum - KZ589
C.baratii - KZ1462
C.sporogenes - LCL052,LCL099
C.difficile - VPI 10463
C.perfringens - NCTC8239
C.novyi - CMCC64731
C.histolyticum - CMCC64801
C.septicu - CMCC64851
CDC:Centers for Disease Control,Atlanta,USA
CMCC:Center for Medical Culture Collection(Bacteria),Beijing,C
hina
KZ:Kanazawa University,Kanazawa,Japan
LCL:Clostridium Laboratory,Lanzhou Institute of Biological Pro
ducts,Lanzhou,China
NCTC：National collection of Type Cultures,London,United Kingdo
m
VPI:Virginia Polytechnic Institute and State University,Blacks
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