|
广州地区解脲脲原体分离株脲酶基因片段的扩增 克隆及序列分析 |
| |
赖小敏 方国源 李彩霞 王传恩
作者单位：510089 广州，中山医科大学微生物学教研室
本课题为卫生部立项课题(编号96-2-057)
解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)为非淋菌性尿道炎的重要病原体。国外
已测出UU标准株1、8型(SU1、SU8)的脲酶全基因序列，发现有一定差异。我们根据其序列
资料设计了一对UU通用的特异性引物。选择已进行血清型别分析的广州地区UU分离株中优势
型U3、U4、U8各1株培养后提取DNA，用所设计的引物PCR扩增出了671bp的脲酶结构基
因片段。扩增产物酶切后插入pGEM7Zf(+)的HindⅢ+SacⅠ位点，转化大肠杆菌JM109菌
株，碱变性法提取质粒，获得重组质粒经酶切鉴定，重组克隆以荧光标记在DNA自
动测序仪(LI-COR公司产品)上测序。结果显示，大生物群中U4与U8、U4与SU8、
U8与SU8间，核苷酸同源性介于99.1%～99.6%;小生物群中U3与SU1间，同源性为99.
4%；而U3与大生物群中U4、U8间同源性仅分别为90.9%、90.5%，与已发表的SU1与SU
8间同源性为90.5%相似。提示国内同群各型分离株间脲酶基因序列变异程度很小，与同群
标准株比较也无多大变异；而两个生物群间变异则较大。此结果或许可以解释UU两群间产脲
酶量、致病性等方面存在差异现象，也表明脲酶基因不能用于UU的分型，但用于研究开发分
组及通用诊断试剂则具有广阔的应用前景。
(收稿：1997-12-22 修回：1998-03-02)
上一个医学论文： 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1羧基端编码基因真核表达重组克隆的构建
下一个医学论文： 脉冲场凝胶电泳分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文