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细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应 |
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朱敏生 沈月 许祥裕 朱有华 施凤霞
作者单位：210002 南京， 南京军区军事医学研究所
【 摘要 】 目的 一氧化氮(NO)供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。
方法 采用3H-胍氨酸转换法进行NO合成酶(NOS)活性测定；亚硝酸盐检测；DNA片段的提取及
凝胶电泳分析；凋亡细胞的DAP I染色观察；Western blot分析。 结果 将iNOS真核表达
质粒、pCMV/iNOS转染至Sp2/0骨髓瘤的变异株中，并获得能稳定表达iNOS和合成NO的
重组细胞系(SPmt/iNOS)，表达iNOS的效率为每升培养物含400μg蛋白。利用该细胞作N
O细胞性供体，成功地证实NO能诱导Sp2/0骨髓瘤细胞发生凋亡。 结论 所建细胞性NO供体
应用于NO的生物学功能研究具有NO合成稳定；更能模拟体内细胞间NO的信息传递过程；不
需任何外源刺激即可合成NO等独特优点。所建NO供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。
【 主题词 】 骨髓瘤细胞 细胞凋亡 一氧化氮
Establishment of cellular nitric oxide donor and its apoptosis-induct
ion effect on tumor cells Zhu Minsheng, Shen Yue,Xu Xiangyu,et al.Nan
jing Military Institute of Medical Science,Nanjing,210002
【 Abstract 】 NO donor is very important for biofunctional investi
gation on nitric oxide.NO donor frequently used by now is chemical dono
r.In this report,we transfected iNOS expressible plasmid (pCMV/iNOS)
into a mutant of Sp2/0 cells and gained an adhesive phenotype(we named it
as SPmt),and the resultant cells (SPmt/iNOS)expressed iNOS at a level o
f 400μg per liter of culture and synthesized NO steadily. Using the cell
s as cellular NO donor, we demonstrated that they could induce apoptosi
s in Sp2/0 myeloma cells. In conclusion, the cellular NO donor we prepar
ed had three characteristics,those were: l.steady synthesis of NO; 2.
being able to mimic the signal transduction of NO under physiological c
ondition; 3.no need of any stimuli.
【 Subject words 】 Myeloma Apoptosis Nitric oxide
一氧化氮(NO)具有广泛的生理功能，是新近发现的一种重要的信使分子〔1〕。NO
的过量产生和释放可介导脑缺血神经损伤的病理过程〔2〕，以及介导中毒性休克、哮喘及类
风湿性关节炎的病理性血管扩张与组织损伤，此外还与某些细胞因子的副作用有关〔3〕。还
有报道证实NO可以介导细胞凋亡〔4、5〕。在研究NO功能的过程中，NO供体是一个重要的
研究工具。目前NO供体可分为二类：一类是化学供体，如硝普钠(SNP)、S-亚硝基-乙酰青霉
胺(SNAP)等。虽
然该类供体被广泛采用，但并不能完全模拟机体细胞中NO的产生过程及状态；另一类为细胞供
体，该类供体[1] [2] 下一页
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